厭氧菌的培養方法

　　厭氧菌在有氧的情況下不能生長(cháng)。要培養厭氧菌，必須創(chuàng )造一個(gè)無(wú)氧的環(huán)境。通常用培養基中加入還原劑，或用物理、化學(xué)方法去除環(huán)境中的游離氧，以降低氧化還原電勢。如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基，牛心腦浸液培養基等。常用的厭氧培養方法有許多，可根據實(shí)際情況選用。

　　1.厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管，可放入厭氧缸內培養，厭氧缸是普通的干燥缸，用物理化學(xué)的方法使缸內造成厭氧環(huán)境，從而將厭氧菌培養出來(lái)。

　　2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內造成厭氧環(huán)境來(lái)培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣，內裝氣體發(fā)生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑。放入已接種好的平板后，盡量擠出袋內空氣，然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管，后折斷美蘭指示劑管，命名袋內在半小時(shí)內造成無(wú)氣環(huán)境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態(tài)，可以孵育。

　　3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個(gè)密閉的大型金屬箱，箱的前面有一個(gè)有機玻璃做的透明面板，板上裝有兩個(gè)手套，可通過(guò)手套在箱內進(jìn)行操作，故名。箱側有一交換室，具有內外二門(mén)，內門(mén)通箱內先關(guān)著(zhù)。欲放物入箱，先打開(kāi)外門(mén)，放入交換室，關(guān)上外門(mén)進(jìn)行抽氣和換氣(H2，CO2，N2)達到厭氧狀態(tài)，然后手伸入手套把交換室內門(mén)打開(kāi)，將物品移入箱內，關(guān)上內門(mén)。箱內保持厭氧狀態(tài)，也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢(qián)殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度，本身是孵箱或孵箱即附在其內，還可放入解剖顯微鏡便于觀(guān)察厭氧菌菌落，這種厭氧箱適于作厭氧細菌的大量培養研究，大量培養基可放入作預還原和厭氧性無(wú)菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環(huán)境和溫度等均系自動(dòng)調節。

　　4.厭氧盒：原理同厭氧袋，有成品銷(xiāo)售。

　　5.生物耗氧法：在一密閉的容器內放以生物(多是植物)，消耗氧氣，同時(shí)產(chǎn)生二氧化碳，供細菌生長(cháng)用。我沒(méi)見(jiàn)過(guò)。

　　6.焦性末食子酸法：在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙，均勻撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面，用融化的白蠟封邊，造成一個(gè)封閉空間。焦性末食子酸與堿反應后耗氧。該法用于厭氧不嚴格的厭氧菌的培養，簡(jiǎn)單。如有梭狀芽孢桿菌。

　　7.皰肉培養基：本身就是一個(gè)不需特殊設備的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大試管，液面封凡士林，造成無(wú)氧環(huán)境。