分子生物學(xué)實(shí)驗室的構建方案

　　分子生物學(xué)作為基因工程的上游技術(shù)，其實(shí)驗的成果和準確性將決定下游所有的步驟和最終的實(shí)驗結果。所以構建一個(gè)完備的分子生物學(xué)實(shí)驗室是非常重要的，以下就讓我們來(lái)看看構建一個(gè)分子生物學(xué)實(shí)驗室需要哪些儀器。

　　1. 冰箱: 根據藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要，必須具備不同控溫級別的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。-20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質(zhì)樣品等。-80℃適合某些長(cháng)期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。0-10℃的層析冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實(shí)驗。

　　2. 培養箱：37℃恒溫箱用于細菌的平板培養及分子生物學(xué)實(shí)驗。

　　3. 恒溫培養搖床：用于大腸桿菌等生物工程菌種的擴增。

　　4. 水浴鍋：用于保溫并進(jìn)行各類(lèi)實(shí)驗。

　　25-100℃水浴搖床可用于分子雜交試驗，各種生物化學(xué)酶反應等試驗的保溫。

　　含低溫的水浴槽可以用于分子生物學(xué)的質(zhì)粒與基因片段的連接等實(shí)驗及用于42度的大腸桿菌感受態(tài)的熱激。

　　5. 烘箱：主用于烘干實(shí)驗器皿，有些需要溫度高些，有些需要溫度低些。用于RNA方面的實(shí)驗用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進(jìn)行烘干。

　　6. 超純水機：隨著(zhù)分子生物學(xué)的飛速發(fā)展，許多實(shí)驗對水純度的要求越來(lái)越高，用自來(lái)水、蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水，磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環(huán)。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA測序、酶反應、組織和細胞培養等。

　　7. 蒸汽消毒鍋：分子生物學(xué)所用大部分試劑，而且實(shí)驗用具都應嚴格消毒滅菌。用于小批量物品的隨時(shí)消毒。大批實(shí)驗物品、試劑、培養基可使用大型消毒且定時(shí)進(jìn)行消毒。

　　8. 濾器濾膜：不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。

　　9.各種天平：臺秤、精密電子分析天平，用于精確稱(chēng)量各類(lèi)試劑。

　　10.液體體積的度量：量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯、錐形瓶　等。

　　11.pH計：測定溶液中H+的直接電位的儀器，主要通過(guò)一對電極，在不同的pH溶液中產(chǎn)生不同的電動(dòng)勢用pH值表示出來(lái);

　　pH試紙：只適用于培養液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計。而大部分試劑的配制要求嚴格的pH值，需精確度高(小數點(diǎn)后兩位)的pH計。

　　12. 分光光度計：光密度、分光光度計是利用物質(zhì)在可見(jiàn)光和紫外線(xiàn)區域中的吸收光譜來(lái)鑒定該物質(zhì)的性質(zhì)及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測量?jì)x表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質(zhì)定量的方便指標之一，通過(guò)所產(chǎn)生的單色光而測定某一溶液對該單色光的吸收值，利用它可進(jìn)行核酸溶液定量和純度的初步判斷。OD值也可以作為菌濃的檢測指標。

　　13. 高速離心機：最大轉速25000 r/m ，最大離心力89000g。有冷凍和常溫兩種，多用于制備和手收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。

　　14.超凈工作臺：內有紫外燈、照明燈、還應有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設備，是一種提供局部潔凈度的設備。其原理是鼓風(fēng)機驅動(dòng)空氣，經(jīng)過(guò)低、中效的過(guò)濾器后，通過(guò)工作臺面，使實(shí)驗操作區域成為無(wú)菌的環(huán)境。

　　15.電泳系統：電泳技術(shù)是檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特征，甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的工具之一。

　　電泳系統分為電源和電泳槽，電源需經(jīng)穩流通過(guò)穩壓器，既能提供穩定的直流電，又能輸出穩定的電壓;水平式電泳槽：一般分為微型電泳槽和大號水平式電泳槽

　　16.PCR儀：Polymerase Chain Reaction儀，也稱(chēng)DNA熱循環(huán)儀，基因擴增儀，它是使一對寡核苷酸引物結合到正負DNA鏈上的靶序列兩側，從而酶促合成拷貝數百萬(wàn)倍的靶序列DNA片段，它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進(jìn)行的DNA變性，引物復性，DNA聚合酶催化的延伸反應三個(gè)過(guò)程。需要說(shuō)明的是，有些實(shí)驗室可能還需要梯度PCR儀或實(shí)事定量熒光PCR儀來(lái)進(jìn)行一些特殊的分子生物學(xué)實(shí)驗。

　　17.凝膠成像分析系統：百泰克UltraPowerTM可見(jiàn)光凝膠投射儀是一個(gè)不錯的選擇，價(jià)格不到七千，檢測靈敏度能到pg級(紫外和EB只能到5ng)，而且不用紫外和EB，更安全，操作和拍照非常方便。

　　18.其他設備

　　1. 微波爐：便于一些溶液的快速加熱和定溫加熱，電泳瓊脂糖凝膠配制、溶化等。

　　2. 制冰機：用于制造大多數核酸、蛋白質(zhì)的實(shí)驗操作所需的低溫環(huán)境，以減少核酸酶或蛋白質(zhì)酶的水解。

　　3. 層析裝置：(色譜分離)是一種分離多組分混合物的有效物理方法。

　　真空印記系統，DNA合成/測序儀：這些都是對核酸進(jìn)行深入研究的必備儀器。

　　4. 磁力攪拌器：多角度旋轉混勻器、快速振蕩混合器：用于混合儀器。

　　5. 組織勻漿器：超聲組織及細胞破碎器，用其進(jìn)行樣品的分離提純實(shí)驗。

　　6. 通風(fēng)櫥：很多溶劑能逸出毒氣，必備柜 ，放射性試驗還要有有機玻璃屏蔽。

　　7. 玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器：用于酚等有機溶劑的蒸餾。

　　8. Tip頭、Eppendorf管：

　　微管移液器tip頭(吸液尖)、Eppendorf管(微量離心管)可洗滌，硅化消毒后反復使用。對一些要求嚴格的實(shí)驗，如RNA的提取、保存等操作，應使用新的消毒tip頭與Eppendorf管。另外還應備有常用規格的離心管(1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等)及96孔、24孔、12孔、6孔的細胞培養塑料平板等。

　　9. 小型設備、用具：

　　定時(shí)器、濾膜、保鮮膜、防護眼鏡鴨嘴鑷、常規的玻璃或塑料器皿(包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保存的試劑應使用棕色試劑瓶，如飽和酚、巰基乙醇等)、記號筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等)