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    研究人員開(kāi)發(fā)出對水、土壤中的病原體檢測的快速方法

    [2015/10/10]

      以色列本-古里安大學(xué)和美國麻省理工學(xué)院的研究人員開(kāi)發(fā)出一種高敏感度,節約成本的技術(shù),只需在24小時(shí)之內,就能快速完成空氣、土壤、水和農產(chǎn)品中的細菌性病原體檢測。

      根據這項研究的領(lǐng)導者,正在本-古里安大學(xué)扎克伯格水研究所攻讀博士學(xué)位的以斯拉奧洛夫斯基博士介紹,“現場(chǎng)樣本中快速可靠的病原體檢測對于公共衛生、安全和環(huán)境監測是至關(guān)重要的。目前在食品、水或臨床應用上使用的方法需要依賴(lài)實(shí)驗室以及花費大量的時(shí)間培養技術(shù),比如在乳品業(yè)、廢水和徑流處理這樣的活動(dòng)中,需要在環(huán)境樣本中實(shí)時(shí)監測病原體。

      這項發(fā)表在《水、空氣&土壤污染》期刊網(wǎng)絡(luò )版上的研究,定義了一個(gè)準確的、價(jià)格低廉的、高通量的以及快速的替代方法來(lái)檢測不同環(huán)境樣本中的病原!斑@是首次在種類(lèi)廣泛的環(huán)境樣本類(lèi)型中,全面評估病原體濃度的研究,通過(guò)標準(或傳統)方法,利用完整的并行測試,實(shí)現多病原檢測。

      “我們能夠在24小時(shí)內準確地確定土壤樣品中的沙門(mén)氏菌,而傳統的方法需要四到五天,而且需要分類(lèi),”以斯拉奧洛夫斯基博士說(shuō)!拔覀冞成功地確定了一種致命的感染,銅綠假單胞菌,存在于氣溶膠中,是國內污水處理系統中的產(chǎn)生的。結果表明,我們開(kāi)發(fā)的技術(shù)提供了一種廣泛的方法,在具有挑戰性的環(huán)境樣品中的快速,高效,可靠地檢測出相對低濃度的致病微生物。

      為了評估這項技術(shù),各種類(lèi)型的環(huán)境樣本,包括氣溶膠,各種土壤類(lèi)型,廢水和蔬菜表面(番茄),被同時(shí)侵入了沙門(mén)氏菌或銅綠假單胞菌。研究人員選擇了這些病原是因為他們是主要的致病病原,在環(huán)境中有著(zhù)較高的生存潛能,而且在濃度低的時(shí)候很難被準確地檢測出來(lái)。

      “當這個(gè)方法應用于沒(méi)有侵入病原的現場(chǎng)樣本時(shí),我們的方法顯著(zhù)優(yōu)于標準方法,能夠在收到樣本一天之內檢測出病原,” 以斯拉奧洛夫斯基博士說(shuō)!坝捎谶@個(gè)集中而且經(jīng)濟的檢測程序告訴我們在一天之內重點(diǎn)檢測哪里,因此我們不需要花費幾天時(shí)間來(lái)檢測數以百計的樣本和子樣本!

      這個(gè)快速檢測方法同時(shí)使用了兩種技術(shù),一個(gè)是用于微生物檢測的進(jìn)化的“MPN-type enrichment”技術(shù),再加上廣泛用于分子生物學(xué)用于實(shí)時(shí)監測DNA擴增的“qPCR”技術(shù)。

      “我們大大縮短了之前的方案,也不再使用任何名牌昂貴的試劑對DNA進(jìn)行提純和凈化,也不用增加工作流程,從原始樣品很容易地進(jìn)行到qPCR實(shí)驗,” 以斯拉奧洛夫斯基博士說(shuō)。

      土壤、水和蔬菜樣本的檢測是高度敏感的(低至每一個(gè)細胞的測試),研究人員認為需要額外的步驟來(lái)進(jìn)一步提高檢測水平,使得這項技術(shù)能夠反映出氣溶膠中的低病原濃度(特別是低濃度感染劑量)。

      研究人員推薦今后用這種方法來(lái)檢測其他病原,如軍團菌,金黃色葡萄球菌和空腸彎曲桿菌,其中第二個(gè)病菌是食源性疾病的最常見(jiàn)原因。


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