石磊：快速檢測方法是轉基因檢測的大方向

　　2015年4月9日“第八屆中國國際食品安全技術(shù)論壇”(以下簡(jiǎn)稱(chēng)：CBIFS 2015)在揚州市揚州會(huì )議中心開(kāi)幕。論壇開(kāi)幕式的當天同時(shí)舉辦了四個(gè)專(zhuān)題技術(shù)研討會(huì )，分別是：食品安全分析檢測技術(shù)研討會(huì )、食品安全快速檢測技術(shù)研討會(huì )、食品中微生物及毒素檢測技術(shù)研討會(huì )、農獸藥殘留及重金屬檢測技術(shù)研討會(huì )。

　　在食品安全快速檢測技術(shù)研討會(huì )中，來(lái)自華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院的石磊教授做了題為“新型快速轉基因檢測方法在食品中的應用”的主題報告。

　　石磊在報告中首先按照檢測對象對食品轉基因方法進(jìn)行了分類(lèi)，一種是核酸檢測，其主要采用普通PCR、實(shí)時(shí)熒光PCR、巢氏PCR、競爭性PCR、基因芯片技術(shù);另一種是蛋白質(zhì)檢測，主要采用的是ELISA、免疫試紙條、Westem印記技術(shù)。石磊題道，國外許多政府檢測機構都在大量使用快速檢測方法，尤其是ATP法、免疫法、阻抗法和顯色培養基法，這些快速檢測方法在國外應用相當成功。國內的許多政府檢測機構也都已經(jīng)在使用或正在考慮使用國外先進(jìn)的快速檢測技術(shù)。石磊說(shuō)，從長(cháng)遠發(fā)展趨勢來(lái)說(shuō)，快速方法是轉基因檢測的大方向。

　　石磊在報告中介紹了目前常用的轉基因檢測方法，如膠體金免疫層析檢測條、PCR—聚合酶鏈式反應技術(shù)、熒光PCR技術(shù)等。他說(shuō)，熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)是目前主流的分子檢測技術(shù)，相關(guān)產(chǎn)品占據全球分子診斷市場(chǎng)的一半。然而這種技術(shù) 由于核酸檢測過(guò)程復雜、實(shí)現核酸擴增信號檢測設備價(jià)格高、對實(shí)驗室硬件條件要求高等問(wèn)題，只局限于高端市場(chǎng)，普及推廣困難，基層醫療和檢測機構需求得不到滿(mǎn)足。

　　基于此種現狀，石磊及其團隊開(kāi)發(fā)了新型恒溫熒光核酸擴增分子檢測平臺。據石磊介紹說(shuō)，該平臺的反應原理是一種新型的等溫擴增技術(shù)，即等溫多自配引發(fā)擴增(IMSA)，反應體系是具有鏈置換特性的DNA聚合酶、dNTP、適宜的緩沖液和模板DNA，能夠識別靶DNA7個(gè)特異序列的6條引物。他說(shuō)，該方法特異性強，6條引物對靶序列的7個(gè)特異序列區的識別保證了IMSA擴增的高特異性;且等溫高效，IMSA在等溫條件下擴增，不會(huì )因為溫度改變而造成時(shí)間的損失，而且受非靶序列的影響小，與PCR相比，其檢測極限更小，僅為幾個(gè)拷貝�；�于這些優(yōu)點(diǎn)，IMSA在1小時(shí)可完成檢測，核酸染料后，肉眼就可觀(guān)察結果且反應不需PCR儀和特殊試劑。

　　石磊介紹說(shuō)，IMSA技術(shù)已經(jīng)成功產(chǎn)業(yè)化。目前，一臺恒溫熒光檢測儀、搭配一臺金屬浴、一臺混勻器、一臺小型離心機及移液器和檢測試劑盒即可成為一套可移動(dòng)的轉基因檢測實(shí)驗室。