RT-PCR、Western blot和ELISA三者的區別

　　PCR是從轉錄水平上檢測目的基因，而非蛋白，從轉錄到翻譯還有復雜的過(guò)程，因此基因的表達量與蛋白的表達量不一定是正相關(guān)的。
　　WB只能半定量，但是可以檢測細胞膜蛋白，這點(diǎn)ELISA做不到。
　　ELISA可用定量方法檢測蛋白，也就是說(shuō)你可以觀(guān)察不同濃度刺激物對目的蛋白的影響。
　　基因翻譯蛋白質(zhì)，PCR可以檢測基因的表達量，絕對定量和相對定量。但基因翻譯表達蛋白質(zhì)是個(gè)復雜的過(guò)程，有可能出現基因量大而蛋白質(zhì)少，或者相反，甚至其他情況。所以，PCR是從基因層面DNA或mRNA進(jìn)行的檢測，而Western Blot是目前一種結合內參對蛋白質(zhì)進(jìn)行半定量的方法，Elisa可以定量檢測某些蛋白、激素等。

　　一、目的
　　雖然兩者都是通過(guò)抗原抗體反應對蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測，WB主要還是定性，Elisa可以定性，也可以定量。
　　WB所檢測的一般是抗原，而Elisa抗原抗體都可以檢測。
　　WB所檢測的抗原可以知道其分子量的大小，或是否是多聚體、降解產(chǎn)物等，一句話(huà)，WB可以確定所用抗體是與那種蛋白起作用的；而Elisa無(wú)能為力，一鍋端了。

　　二、模式
　　WB是（抗原-抗體-二抗酶）模式進(jìn)行檢測；Elisa模式有多種，如（抗原-抗體-二抗酶）、（抗原-抗體-抗原酶）、（抗抗體-抗體-抗原酶）、（抗體-抗原-抗體酶）、（抗抗體-抗體-抗原-抗體酶）等等很多很多。

　　三、抗體的適用性
　　WB所適用的一抗一般是線(xiàn)性位點(diǎn)的，ELISA線(xiàn)性或構象型抗體都可以使用。從另一個(gè)意義上講，WB可以做抗體是線(xiàn)性位點(diǎn)還是構象型位點(diǎn)的補充判定，而Elisa不行。

　　四、靈敏度
　　一般Elisa的靈敏度要遠高于WB，這從一般酶標記物的使用濃度或待檢樣品的稀釋度上就可以看出。

　　五、可操作性
　　WB一次處理量就是一塊膠版，10-20個(gè)樣品最多了。Elisa一塊96孔板一次可以處理96個(gè)樣本，可以設置多個(gè)復孔、對照、梯度樣等來(lái)提高檢測的可信度。
　　WB操作常見(jiàn)的非特異性條帶，膜本底差，顯色不好等等缺點(diǎn)在Elisa上表現得要好得多。

　　六、商品化度
　　WB不管怎樣，都要自己先做電泳。而Elisa有很多成熟的商品化試劑盒了，只要不怕花錢(qián)，檢測要方便快捷得多。