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    細胞凍存方法

    [2014/12/31]

      1.細胞:選對數生長(cháng)期細胞,收集細胞24小時(shí)前換液一次。

      2.計數:按常規方法把細胞制成細胞懸液,計數,令細胞密度達5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。

      3.凍存液:先用培養液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。

      4.分裝:分裝入無(wú)菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。

      5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時(shí)可浸入藍色液中觀(guān)察,為安全起見(jiàn),把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時(shí)因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線(xiàn)繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱(chēng),凍存日期,以便日后查找。

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