血漿游離血紅蛋白測定

　　實(shí)驗原理

　　血紅蛋白具有類(lèi)過(guò)氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態(tài)氧，使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化，由無(wú)色最終變?yōu)樗{紫色。根據顯色深淺與標準進(jìn)行比較，可測出其含量。

　　實(shí)驗方法

　　材料：

　　1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液

　　2.1%H2O2

　　3.10%醋酸溶液

　　4.分光光度計

　　方法：

　　1.抽取靜脈血2-3ml，枸櫞酸鈉抗凝，離心分離血漿。

　　2.按下表進(jìn)行操作，用分光光度計，波長(cháng)為530nm，以空白管調零，測定測定管的吸光度。

　　試劑 (ml)測定管空白管

　　2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液0.50.5

　　患者血漿0.02/

　　1% H2O20.50.5

　　混勻后室溫放置10min

　　10%醋酸溶液5.05.0

　　室溫放置10min

　　3.計算公式

　　血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100

　　實(shí)驗結果計算

　　參考范圍：0-40mg/L

　　注意事項

　　1.一切容器避免血紅蛋白污染;

　　2.采血要順利，器皿要干燥，檢測血漿要新鮮，及時(shí)分離，防止人為溶血;

　　3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性，檢測時(shí)要小心，廢液要妥善處理，以免污染;

　　4.雙氧水要新鮮配置，濃度要準確。