三點(diǎn)鑒定抗血清質(zhì)量

　　抗血清的質(zhì)量直接影響分析方法的特異性和靈敏度。用于鑒定抗血清質(zhì)量的參數主要有幾項：

　　1.親和性(affinity) 是指抗體分子上一個(gè)抗原結合部位與相應的抗原決定簇之間的結合強度，常用親和常數Ka表示。Ka是正/逆向反應速度常數的比值，單位為稀釋度單位(L/mol或LM-1)，表示需將lmol抗體稀釋至多少升，才能使抗原—抗體結合下降50%;而Ka的倒數為解離常數(Kd)，其單位為濃度單位(mol/L)。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準確度，需選用Ka值高(109一1012L/mo1)的抗血清。

　　2.特異性(specificity) 是指一種抗體識別相應抗原決定簇的能力。由于一種抗原常有結構極相似的類(lèi)似物(同類(lèi)物、前體、降解物和代謝物)，其抗血清可能對該抗原的類(lèi)似物產(chǎn)生交叉反 應。因此，抗體的特異性通常以交叉反應率表示：將反應的最大結合率抑制下降50%時(shí)特異性抗原與類(lèi)似物的劑量(ED50)之比來(lái)計算交叉反應率。如胰島素標準品使125I胰島素與抗血清的最大結合下降50%的用量為0.5ng，而類(lèi)似的物(前體)胰島素原的用量為500ng，則相應的交叉反應率(%)為：0.5/500=0.1%。

　　抗體交叉反應程度的高低直接影響測定結果的準確性，但應注意，抗血清特異性與分析方法特異性并不完全相同，因后者對某一待測抗原的特異性程度不僅取決于所用抗體，尚有賴(lài)于標記物的質(zhì)量和方法學(xué)設計。

　　3.效價(jià)(titer) 是反映抗血清中有效抗體含量的相對參數，即抗血清稀釋至能與抗原發(fā)生有效反應的最大稀釋度。通常是將一株抗血清作系列稀釋后與標記抗原反應，計算不同稀釋 度時(shí)抗體結合標記抗原的百分率，繪制出抗體稀釋度曲線(xiàn)。結合具體方法設計要求。效價(jià)一般指結合50%標記抗原時(shí)，抗血清的稀釋度。