評估UPLC/UV分析中的交叉污染

　　目的

　　為證實(shí)ACQUITY UPLC® I-Class系統對于多種樣品(包括極高濃度的樣品)均具有低交叉污染性能。

　　背景

　　當需要在同一次色譜分離中同時(shí)定量高濃度及低濃度的組分時(shí)所面臨的最大的挑戰是需解決樣品殘留問(wèn)題。通常，為觀(guān)察低含量的與主要分析物相關(guān)的雜質(zhì)，必須注射高濃度的樣品。為對分析物中的雜質(zhì)進(jìn)行精確分析，必須解決好分析物的樣品殘留問(wèn)題，以使得不會(huì )因為低估存在于樣品中的雜質(zhì)的量，從而影響雜質(zhì)計算值。在進(jìn)行雜質(zhì)分析時(shí)，樣品濃度需達很高，且解決途徑可能頗具挑戰性。應注意稀釋液、流動(dòng)相、以及清洗溶劑的組分，以使樣品殘留量較低。系統設計在解決樣品殘留問(wèn)題上也具有重要作用。通常，樣品導入分析系統的方式越簡(jiǎn)單，則越容易解決樣品殘留問(wèn)題，特別是當采用注射方法導入多種疏水性及極性差異較大的化合物時(shí)。

　　ACQUITY UPLC I-Class系統可以輕松解決頗具挑戰性的某些相關(guān)化合物分析時(shí)的交叉污染問(wèn)題。

　　解決方案

　　ACQUITY UPLC I-Class系統在設計上可實(shí)現低交叉污染，因而在用于分析多種相關(guān)化合物時(shí)具有極佳性能。Sample Manager的流通針式進(jìn)樣(FTN)設計可帶來(lái)優(yōu)化的高精度注射，并獲得極佳的樣品回收率。在等度運行期間使用梯度溶液清洗針頭的內部，且在色譜運行期間清洗針頭外部。

　　這樣就很好地解決了樣品殘留問(wèn)題，并且不會(huì )使總注射循環(huán)時(shí)間增加。為證實(shí)使用ACQUITY UPLC I-Class系統可很容易解決樣品殘留問(wèn)題，選擇性質(zhì)差異較大的三種不同化合物。氯已定較粘稠，且通常非常難以完全自進(jìn)樣器去除。鄰苯二甲酸二辛酯是疏水性極強的一種化合物，且需要高濃度的乙腈來(lái)使它從色譜柱上洗脫�？Х纫蚴怯H水性物質(zhì)，且通常不難以從進(jìn)樣器上去除，因而使其成為極佳的探針化合物，用以確定沒(méi)有樣品仍殘留于該系統中。按UV響應為1.5 AU ± 0.1 AU的濃度注射各化合物，并測定在隨后的空白注射中的樣品殘留量。對所有這些化合物，均未檢測到可測得的樣品殘留量。為確定每種化合物的樣品殘留量，制備高濃度的樣品(20x至40x濃縮)，并注射至ACQUITY UPLC I-Class FTN。測定每種化合物在首次空白注射中的樣品殘留量，得知這三種性質(zhì)差異較大的分析物的樣品殘留量均少于0.001%。

　　小結

　　解決多種分析物的樣品殘留問(wèn)題的能力是一個(gè)分析系統的重要性能。不論分析物的性質(zhì)為何，ACQUITY UPLC I-Class系統的設計均可產(chǎn)生極低的交叉污染。Sample Manager的FTN注射平臺的設計簡(jiǎn)單、靈活，因而可簡(jiǎn)單直觀(guān)地對方法進(jìn)行優(yōu)化;因而可滿(mǎn)足挑戰較大的應用的要求，例如分析低濃度相關(guān)化合物。