CAR-T生產(chǎn)工藝優(yōu)化 | 賽多利斯與藝妙神州聯(lián)合專(zhuān)訪(fǎng)

4月16日-17日，賽多利斯集團旗下賽多利斯斯泰帝（Sartorius Stedim Biotech）與北京藝妙神州醫藥科技有限公司雙方高層相聚在上海舉辦的CAR-T細胞治療研發(fā)及生產(chǎn)工藝論壇，就CAR-T生產(chǎn)工藝的優(yōu)化，及CAR-T研究的新進(jìn)展等問(wèn)題展開(kāi)討論。

賽多利斯與藝妙神州于2018年11月共同建立“聯(lián)合實(shí)驗室”，致力于將基因細胞藥物應用于惡性腫瘤治療。論壇中小編有幸對賽多利斯與藝妙神州進(jìn)行了聯(lián)合專(zhuān)訪(fǎng)。以下為采訪(fǎng)的主要內容：

Q：藝妙神州創(chuàng )辦至今在不斷摸索建立CAR-T細胞的生產(chǎn)流程，可否與我們分享下工藝優(yōu)化及放大上的難點(diǎn)及心得體會(huì )。

A（何霆博士）：整個(gè)CAR-T工藝是比較復雜的，藝妙神州初期建立了實(shí)驗室級的生產(chǎn)工藝，過(guò)程中也在不斷優(yōu)化，現在已進(jìn)入臨床級的生產(chǎn)階段。工藝中確實(shí)有很多難點(diǎn)，首先就是慢病毒的生產(chǎn)，如何實(shí)現高效的生產(chǎn)慢病毒，并實(shí)現慢病毒生產(chǎn)工藝的穩定放大，是行業(yè)普遍面臨的難點(diǎn)�，F階段生產(chǎn)慢病毒，多數采用貼壁的方式進(jìn)行細胞培養，貼壁培養的scale-up挑戰很大，另外，在貼壁培養過(guò)程中，需要添加血清，血清的來(lái)源以及血清殘留都需要考慮。另外在T細胞的擴增培養階段也有一些難點(diǎn)，縮短T細胞擴增時(shí)間，提高T細胞的陽(yáng)性率，為病人爭取寶貴的時(shí)間，是每個(gè)CAR-T企業(yè)努力的目標。

Q：賽多利斯在CAR-T生產(chǎn)工藝環(huán)節有獨特的設計理念及硬件設備？

A（沈亮博士）：ICH和FDA都在提倡質(zhì)量源于設計應用在藥物的開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)中，其中很重要的一個(gè)方面是我們在開(kāi)發(fā)工藝的同時(shí)要保證整個(gè)工藝的穩健性。我們不僅是設備供應商，同時(shí)也為客戶(hù)提供解決方案，比如在高通量篩選、硬件軟件結合用于工藝開(kāi)發(fā)、工藝表征、工藝監控等方面，為客戶(hù)的生產(chǎn)工藝穩健性提供支持。在CAR-T方面會(huì )與客戶(hù)保持多方面的探討，比如在CAR-T生產(chǎn)過(guò)程中會(huì )跟客戶(hù)一起合作對貼壁細胞進(jìn)行懸浮馴化工藝開(kāi)發(fā)，也會(huì )采用我們的ambr®高通量平臺工具。此外，賽多利斯提供的工藝設備能實(shí)現從實(shí)驗室小試到GMP生產(chǎn)的線(xiàn)性放大，在包膜病毒類(lèi)的病毒計數儀能在數分鐘內完成定量檢測，在細胞培養、分離純化和一次性流體管理等產(chǎn)品應用都有很好的數據和應用案例來(lái)支持。同時(shí)賽多利斯提供的解決方案也包含了從風(fēng)險評估、試驗設計（DoE）、設計空間和操作空間等方面給予客戶(hù)比較完善的應用支持。這些方面都大大節省了客戶(hù)的時(shí)間和成本投入。

Q：2018年，藝妙神州與賽多利斯合作成立了“聯(lián)合實(shí)驗室”。為何會(huì )選擇賽多利斯作為合作伙伴？

A（何霆博士）：藝妙神州非常榮幸能夠選擇國際上領(lǐng)先的供應商賽多利斯作為合作伙伴，我們最看重的有幾點(diǎn)：一是擁有生物制藥行業(yè)從上游到下游的完整解決方案，賽多利斯作為上游和一次性使用產(chǎn)品領(lǐng)導者，具有豐富的產(chǎn)品線(xiàn)和高品質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量；其次是賽多利斯有著(zhù)跟全球制藥企業(yè)合作的豐富的經(jīng)驗，貫穿整個(gè)藥物周期，能夠給到我們企業(yè)很好的具有建設性的建議和幫助；三是賽多利斯的服務(wù)理念，設備樣品的支持以及技術(shù)的支持都是及時(shí)高效的，質(zhì)量源于設計的理念貫穿在我們質(zhì)粒與病毒工藝開(kāi)發(fā)中。

Q：公司目前的靶點(diǎn)CD19、BCMA和CD123，在國內外都有同行在做，藝妙神州選擇這些靶點(diǎn)的原因，以及自身有哪些優(yōu)勢？在新的產(chǎn)品探索上，我們注意到最近與和鉑的轉基因小鼠平臺合作，未來(lái)的管線(xiàn)會(huì )擴展哪類(lèi)的靶點(diǎn)，或者哪些新的適應癥？

A（何霆博士）：研究最快的是CD19，確實(shí)國外的產(chǎn)品已經(jīng)上市，但在CAR-T這個(gè)領(lǐng)域，同樣的靶點(diǎn)還是有很大的機會(huì )，我們設計的胞內段和胞外段抗體結構都與其他產(chǎn)品存在區別，在適應癥上也可以有一些區別，有的整個(gè)工藝中，成本較高，國內患者接受不了，我們在生產(chǎn)的過(guò)程中，生產(chǎn)成本較低，產(chǎn)品療效好，將來(lái)在市場(chǎng)上也會(huì )有較大的競爭力。除了CD19 之外，我們也在探索一些新的靶點(diǎn)，用于實(shí)體瘤的治療。未來(lái)有新的進(jìn)展會(huì )與大家分享。

Q：FDA、NMPA對CAR-T細胞生產(chǎn)的核心要求是什么？賽多利斯的解決方案和技術(shù)如何幫助客戶(hù)滿(mǎn)足這些要求？

A（沈亮博士）：技術(shù)應用的目標是保障客戶(hù)工藝的穩健性。通過(guò)質(zhì)量源于設計的實(shí)施，來(lái)保證工藝的穩健性。這種實(shí)施是基于科學(xué)與風(fēng)險評估的方案設計，結合平臺技術(shù)，找到設計空間，保證從質(zhì)粒到病毒再到T細胞的工藝穩健性。賽多利斯的產(chǎn)品在CAR-T行業(yè)的應用覆蓋從小試開(kāi)發(fā)到商業(yè)化生產(chǎn)整個(gè)階段，解決方案完全符合相關(guān)法規要求。我們的風(fēng)險評估、DoE、設計空間、多變量數據分析是一起推進(jìn)并整合在工藝中，在此基礎上，客戶(hù)還期望提高樣品與PoC檢測的效率，而賽多利斯的VirusCounter病毒計數儀， 可以做到一分鐘之內做到定量分析病毒載體，縮短了工藝上一些常規項目的檢測時(shí)間。我們也對比了這種新技術(shù)與傳統病毒檢測技術(shù)，保障數據的真實(shí)、有效、可靠。

Q：賽多利斯對細胞治療這個(gè)行業(yè)的發(fā)展會(huì )是怎樣？有哪些挑戰？ 

A（沈亮博士）：隨著(zhù)技術(shù)的突破以及資金的青睞，國內細胞治療治療行業(yè)發(fā)展迅猛，市場(chǎng)發(fā)展，挑戰不斷，目前企業(yè)都不具備大規模生產(chǎn)能力。在推進(jìn)產(chǎn)業(yè)化的過(guò)程中，整個(gè)行業(yè)都一個(gè)面對一些問(wèn)題，如何防止交叉污染，如何看待生物安全，如何讓生產(chǎn)工藝高效，快速占領(lǐng)先機？一次性、封閉式、自動(dòng)化是未來(lái)細胞/基因治療的發(fā)展趨勢。

1. 一次性，由于一次性技術(shù)具有快速靈活的優(yōu)勢、占地面積小、生產(chǎn)靈活度高，尤其對于生產(chǎn)品種較多的企業(yè)，使用一次性系統可以實(shí)現共線(xiàn)并存。

2. 封閉式：基因/細胞治療會(huì )用到病毒載體，非封閉式的操作會(huì )對操作人員和環(huán)境造成生物安全風(fēng)險，這些工藝通常是2級生物安全等級，從生物安全的角度來(lái)看，封閉式的工藝是病毒載體以及和后續細胞工藝階段的最好的方案，賽多利斯針對質(zhì)粒與病毒性載體工藝步驟可以一次性封閉式的GMP生產(chǎn)方案。

3. 自動(dòng)化：由于治療性免疫細胞產(chǎn)品無(wú)法做除菌過(guò)濾、一次性、封閉式、自動(dòng)化的工藝更為重要，包括T細胞的分離、純化、激活、轉導、擴增培養、洗滌等步驟，實(shí)現免疫細胞分離流程自動(dòng)化、模塊化、一次性耗材使用，可以防止最終產(chǎn)品的交叉污染，提高生產(chǎn)效率，賽多利斯專(zhuān)用于T細胞擴增培養BIOSTAT® RM TX 可輕松實(shí)現連接上下游工藝，在線(xiàn)細胞分析BioPAT® ViaMass，可在線(xiàn)分析細胞密度，減少頻繁取樣分析操作。

另外平臺化能很好的節省客戶(hù)的成本，我們的平臺化方案解決方案在全球有足夠的資源和新技術(shù)研發(fā)投入。能夠將新技術(shù)新方案及時(shí)服務(wù)于客戶(hù)。