關(guān)于紫外分光光度計的工作原理以及分類(lèi)

一、紫外分光光度計基本工作原理：

紫外分光光度計基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外可見(jiàn)光照射被分析的有機物質(zhì)，引起分子中價(jià)電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長(cháng)而變化的光譜，反映了試樣的特征。

在紫外可見(jiàn)光的范圍內，對于一個(gè)特定的波長(cháng)，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進(jìn)行定性分析，而且根據吸收與已知濃度的標樣的比較，還能進(jìn)行定量分析。

二、紫外可見(jiàn)分光光度計的分類(lèi)

紫外可見(jiàn)分光光度計的類(lèi)型很多，但可歸納為三種類(lèi)型，即單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長(cháng)分光光度計。

1、單光束分光光度計

經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過(guò)參比溶液和樣品溶液，以進(jìn)行吸光度的測定。這種簡(jiǎn)易型分光光度計結構簡(jiǎn)單，操作方便，維修容易，適用于常規分析。

2、雙光束分光光度計

經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡分解為強度相等的兩束光，一束通過(guò)參比池，一束通過(guò)樣品池。光度計能自動(dòng)比較兩束光的強度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對數變換將它轉換成吸光度并作為波長(cháng)的函數記錄下來(lái)。

雙光束分光光度計一般都能自動(dòng)記錄吸收光譜曲線(xiàn)。由于兩束光同時(shí)分別通過(guò)參比池和樣品池，還能自動(dòng)消除光源強度變化所引起的誤差。

3、雙波長(cháng)分光光度計

由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經(jīng)過(guò)兩個(gè)單色器，得到兩束不同波長(cháng)1和2 的單色光；利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池，然后經(jīng)過(guò)光電倍增管和電子控制系統，最后由顯示器顯示出兩個(gè)波長(cháng)處的吸光度差值。

對于多組分混合物、混濁試樣（如生物組織液）分析，以及存在背景干擾或共存組分吸收干擾的情況下，利用雙波長(cháng)分光光度法，往往能提高方法的靈敏度和選擇性。利用雙波長(cháng)分光光度計，能獲得導數光譜。通過(guò)光學(xué)系統轉換，使雙波長(cháng)分光光度計能很方便地轉化為單波長(cháng)工作方式。如果能在1和2處分別記錄吸光度隨時(shí)間變化的曲線(xiàn)，還能進(jìn)行化學(xué)反應動(dòng)力學(xué)研究。