紫外可見(jiàn)分光光度計該如何使用？

紫外可見(jiàn)分光光度計該如何使用？

紫外分光光度法是根據物質(zhì)的吸收光譜，來(lái)研究物質(zhì)的成分、結構和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見(jiàn)光區任意選擇不同波長(cháng)的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(cháng)的光能量，相應地發(fā)生了分子振動(dòng)能級躍遷和電子能級躍遷的結果。

由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同，因此，每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線(xiàn)，可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。

紫外分光光度計用途

1、檢定物質(zhì)

根據吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是最大吸收波長(cháng)λ-max和摩爾吸收系數ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數。這在藥物分析上就有著(zhù)很廣泛的應用。在國內外的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長(cháng)和吸收系數載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。

2、與標準物及標準圖譜對照

將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見(jiàn)吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應完全一致。如果沒(méi)有標樣，也可以和現成的標 準譜圖對照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準確，精密度高，且測定條件要相同。

3、比較最大吸收波長(cháng)吸收系數的一致性

4、純度檢驗

5、推測化合物的分子結構

6、氫鍵強度的測定

實(shí)驗證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來(lái)判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑。

7、絡(luò )合物組成及穩定常數的測定：

8、反應動(dòng)力學(xué)研究

9、在有機分析中的應用

有機分析是一門(mén)研究有機化合物的分離、鑒別及組成結構測定的科學(xué)，它是在有機化學(xué)和分析化學(xué)的基礎上發(fā)展起來(lái)的綜合性學(xué)科。

紫外分光光度計使用注意事項

1、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素：

他們可以引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降；造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養時(shí)應定期加以校正。使用紫外分光光度計應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，特別是地處南方地區的實(shí)驗室。

2、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械系統的靈活性、降低各種限位開(kāi)關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一：

因此，使用紫外分光光度計必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內衛生條件，防塵。

3、紫外分光光度計儀器使用一定周期后，內部會(huì )積累一定量的塵埃，最好由維修工程師或在工程師指導下定期開(kāi)啟儀器外罩對內部進(jìn)行除塵工作：

同時(shí)，將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔，必要時(shí)對光路進(jìn)行校準，對機械部分進(jìn)行清潔和必要的潤滑。最后，恢復原狀，再進(jìn)行一些必要的檢測、調校與記錄。分析儀器工作者要懂得儀器的日常維護和對主要技術(shù)指標的簡(jiǎn)易測試方法，自己經(jīng)常對儀器進(jìn)行維護和測試，以保證儀器工作在最佳狀態(tài)。

紫外可見(jiàn)分光光度計詳細操作流程及校準方法

1、紫外可見(jiàn)分光光度計光度測量

在模式選擇屏幕中選擇＜1.Photometric光度＞選項，將顯示參數配置屏幕； 

用GOTOWL鍵設定測量波長(cháng)；

按F2鍵設定進(jìn)樣控制；

按START/STOP鍵時(shí)，測量開(kāi)始，顯示測量屏幕；

如需做空白校正，應在測量前先設置空白樣品，然后，按AUTO-ZERO鍵，將測量值置為OABS（100%）；

2、紫外可見(jiàn)分光光度計校正

開(kāi)機預熱10分鐘足矣；

放入黑塊和標樣（沒(méi)有的自己配），關(guān)閉蓋子；

校0；

把燈光對著(zhù)黑塊，把透光度調0；

把燈光對標樣，將吸光度調到100%；

3、參比溶液介紹

參比溶液又稱(chēng)空白溶液。測量時(shí)用作比較的、不含被測物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常，用參比溶液掃描的曲線(xiàn)應是一條平坦的直線(xiàn)。有時(shí)，基體中，雖不含被測物質(zhì)，但含有別的物質(zhì)，這時(shí)必須保證其不影響測試。經(jīng)常碰到的是試劑空白中含有被測物質(zhì)，此時(shí)必須經(jīng)過(guò)純化將其除去。否則將影響測定結果。

4、紫外可見(jiàn)分光光度計使用注意事項

①開(kāi)機前應先預熱15分鐘，然后開(kāi)機自檢；

②濕度要控制在75%左右，溫度在5～30度之間； 

③儀器要穩壓電源，接地要好。并且避免陽(yáng)光直接照射；

5、常見(jiàn)故障及處理方法

光門(mén)不能完全關(guān)閉：修復光門(mén)部件，使其完全關(guān)閉；

透過(guò)率“100%”旋到底了。解決方法：重新調整“100%”旋鈕；

儀器嚴重受潮：可打開(kāi)光電管暗盒，用電吹風(fēng)吹上一會(huì )兒使其干燥，并更換干燥劑

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