秘:如何選擇一臺稱(chēng)心的凝膠成像系統

凝膠成像系統幾乎是每個(gè)分子生物學(xué)實(shí)驗室的必需品。幾十年來(lái)，凝膠成像的設備已經(jīng)從簡(jiǎn)單的紫外線(xiàn)和寶麗來(lái)相機

發(fā)展到先進(jìn)的數字化數據采集和分析系統。它的用途是從瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠上分離的DNA中獲取信息。

據Bio-Rad的全球產(chǎn)品經(jīng)理RaymondMiller介紹，目前很難研究市場(chǎng)，并確定誰(shuí)是凝膠成像系統的客戶(hù)，因為這個(gè)系統的

應用如此廣泛�！斑@是一種無(wú)處不在的技術(shù)。如果你身處生命科學(xué)領(lǐng)域，你就需要用到凝膠成像系統�！�

盡管一些DNA成像應用只需要粗略的測定或“有沒(méi)有”的結果，但大多數的研究人員還是希望獲得最佳的數據質(zhì)量。在選

購凝膠成像系統時(shí)，靈敏度和動(dòng)態(tài)范圍往往是兩個(gè)重要的考慮因素。

很多人認為，相機分辨率是評估系統靈敏度的最佳參數，但Uvitec公司的經(jīng)理KarineVictory認為，“事實(shí)上，靈敏度是通

過(guò)大的鏡頭光圈、出色的低噪聲相機、電子噪聲的進(jìn)一步深度冷卻以及樣品與光圈的最近距離來(lái)實(shí)現的�！彼�提醒說(shuō)，拼

接（binning）的做法可能犧牲CCD相機的分辨率。它允許在圖像捕獲時(shí)收集更多的光，但通過(guò)降低像素總數來(lái)降低總的分辨率。

靈敏度是UVP（德國耶拿旗下公司）開(kāi)發(fā)凝膠成像系統時(shí)優(yōu)先考慮的事情。GelDoc-ItTS3是一臺獨立的成像系統，適合DNA

和蛋白凝膠。它帶有500萬(wàn)像素的相機和廣角f/1.2鏡頭，以提供高分辨率和快速圖像捕獲。這個(gè)系統還可以升級到-57oC的

CCD冷卻相機，用于化學(xué)發(fā)光成像。

UVP的產(chǎn)品經(jīng)理SarahChaudhury認為，最新一代的GelDoc-It系列成像系統的進(jìn)步包括“更靈敏的相機和光學(xué)元件，

以及一鍵式的圖像捕獲和分析自動(dòng)化”。

動(dòng)態(tài)范圍與靈敏度密切相關(guān)。動(dòng)態(tài)范圍寬，則意味著(zhù)在同一幅圖像中可檢測到低水平和高水平的樣品。對于某些應用而言

，動(dòng)態(tài)范圍是重要的考慮因素，例如監控刺激化合物的影響或抑制劑對表達的影響。

LI-CORBiosciences提供了動(dòng)態(tài)范圍超過(guò)6個(gè)對數的儀器。據LI-COR的產(chǎn)品營(yíng)銷(xiāo)經(jīng)理JeffHarford介紹，這意味著(zhù)圖像不會(huì )飽和。

這家公司的OdysseyFc成像儀是為EB、SYTO60或SYBR等染料染色的DNA凝膠而設計的，并配有一次性托盤(pán)，以減少污染。

OdysseyCLx適用于SYTO60染料。

Harford表示，在評估凝膠成像系統時(shí)，數據采集的一致性也需要認真考慮�！皠�(dòng)態(tài)范圍寬的技術(shù)有助于各塊凝膠之間獲得一致的數據。

確保技術(shù)是面向未來(lái)的。出版社很關(guān)心數據的可靠性和重復性，因此你需要確保你的系統每天提供穩定的數據。

系統是否能做什么來(lái)消除凝膠或印跡之間的差異，這是很重要的�！彼�說(shuō)。

盡管一臺簡(jiǎn)單、專(zhuān)用的凝膠成像系統似乎是一個(gè)不錯的選擇，但大多數客戶(hù)感興趣的是多功能的系統，這指的是所分析的凝膠類(lèi)型、

檢測方法和應用范圍。為此，許多制造商生產(chǎn)出多功能的儀器，如多重熒光檢測、兼容比色樣品，甚至有更多的應用，

如Western分析或組織切片分析。

GEHealthcare生命科學(xué)部就提供一系列激光掃描儀，有著(zhù)靈活的應用。它的AmershamTyphoon5生物分子成像儀可以對熒光、

放射性標記和比色樣品進(jìn)行成像、除了適用于DNA凝膠、蛋白凝膠和印跡，這個(gè)系統還可以成像和分析微孔板、培養皿、組織切片及其他許多樣品類(lèi)型。

除了激光掃描儀，GE還提供了兩款CCD相機系統–ImageQuantLAS500和更先進(jìn)的AmershamImager600，可用于DNA凝膠成像。

GEHealthcare的資深科學(xué)家ErikBjerneld認為，研究人員在選擇成像儀時(shí)，應當考慮是否需要化學(xué)發(fā)光檢測。

“如果用戶(hù)主要對化學(xué)發(fā)光感興趣，那么我們建議用CCD成像系統。如果熒光成像的靈敏度和分辨率更加重要，則建議使用激光掃描儀，”他說(shuō)。

目前市場(chǎng)上有一個(gè)趨勢，就是凝膠成像的自動(dòng)化。這意味著(zhù)，你只要將凝膠放入系統中，按下按鈕就能完成分析。大多數系統提供一定程度的自動(dòng)化。

例如，UVP的GelDoc-ItTS3配備了廣泛的自動(dòng)化功能。VisionWorks軟件可以利用預設的拍攝參數，

如自動(dòng)曝光、對焦、縮放等實(shí)現一鍵式的圖像采集。

用戶(hù)考慮的另一個(gè)因素是安全性，這主要涉及到EB的使用。大家都知道，EB是誘變劑，需要特殊處理。

平時(shí)，人們都會(huì )使用手套、防護設備，并防止儀器被EB污染。

如今，許多更安全的染料可用于DNA凝膠，而儀器制造商也對成像系統進(jìn)行了相應的優(yōu)化，以支持這些更安全的選擇。

易用性也是Bio-Rad產(chǎn)品的一大特點(diǎn)。它的產(chǎn)品包括入門(mén)級GelDocEZ系統、功能更全的GelDocXR+系統，

以及適用于工業(yè)規模凝膠成像的GS-900校準密度計�！拔覀兺度肓舜罅烤�力讓這些系統更加易用，”Miller說(shuō)。

這包括大部分凝膠成像工作的自動(dòng)化，比如縮放和對焦。

如今，DNA凝膠成像系統的市場(chǎng)十分成熟，也充滿(mǎn)競爭，在每個(gè)價(jià)格點(diǎn)都有多個(gè)選擇�？偟膩�(lái)說(shuō)，

個(gè)體需求和具體應用始終是首要的考慮因素，比如儀器在特定染料上的表現及檢測方法的切換能力。

人們也許很難找到儀器在特定應用中的一對一比較數據，因此需要密切留意產(chǎn)品資料，并與銷(xiāo)售代表溝通。

當然，這個(gè)系統應當是面向未來(lái)的，考慮到現在及將來(lái)的需求。