液質(zhì)聯(lián)用經(jīng)驗總結

1、酸性物質(zhì)適合做負離子檢測，所以流動(dòng)相中偏堿較合適，促使其解離；堿性物質(zhì)適合做正離子檢測，流動(dòng)相中適當的加入酸，促使其形成正離子；中性物質(zhì)，流動(dòng)相中適當加一些醋酸鈉（或者醋酸銨），可形成加鈉的正離子或者加銨的正離子。

2、糖苷類(lèi)的物質(zhì)在做FAB和esi（＋）時(shí)，[M+Na]峰往往比[M+H]峰要強，此為經(jīng)驗，原因只是推測可能和天然產(chǎn)物的提取過(guò)程有關(guān)；鹽類(lèi)化合物如鹽酸鹽、硫酸鹽在質(zhì)譜中酸的部分一般不會(huì )出現；二羧酸鹽（esi負離子模式）除了分子離子峰外，會(huì )出現連續掉44的兩個(gè)峰，為失去羧酸根的離子，這三個(gè)峰非常特征，但是會(huì )受錐孔電壓的影響，調低電壓譜圖會(huì )更漂亮。

3、胺類(lèi)物質(zhì)做esi質(zhì)譜時(shí)要注意進(jìn)樣量要少，因為很容易離子化，不易沖洗干凈，會(huì )影響后面樣品的測定。像三乙胺在液質(zhì)聯(lián)用時(shí)不能用于調節流動(dòng)相pH值。若不慎引入三乙胺，在正離子檢測時(shí)總會(huì )出現很強的102峰（三乙胺的[M+H]）。

4、質(zhì)譜的基線(xiàn)其實(shí)跟液相的紫外檢測器和熒光檢測器一樣，基線(xiàn)高的原因不外乎內部和外部的原因。

1）你選擇的流動(dòng)相在質(zhì)譜的響應比較高，比如水相比較多的時(shí)候，噪音比較大些；還有如果鹽含量比較大的時(shí)候，噪音更大些。

2）檢測器的靈敏度越高的時(shí)候，噪音應該越高。如果質(zhì)譜的污染比較嚴重時(shí)，基線(xiàn)肯定比較高。比如離子阱檢測器，用得久了，阱中的離子就會(huì )增多，一方面降低了質(zhì)譜的靈敏度，另一方面增加了基線(xiàn)噪音。

3）質(zhì)譜的基線(xiàn)很多時(shí)候還跟你選擇的離子寬度有關(guān)。比如你作選擇離子掃描的時(shí)候，基線(xiàn)就低些。你作選擇反應掃描的時(shí)候，離子寬度不要選得太寬，太寬噪音就高些。

4）多級質(zhì)譜一般做二級或三級質(zhì)譜，基線(xiàn)噪音就低很多。

5、質(zhì)譜夜經(jīng)驗夜紙頁(yè)紙用與維護經(jīng)

驗交液流做樣前－檢查氮氣，流動(dòng)相，質(zhì)譜儀的真空度，毛細管溫度。

1）最好不用直接進(jìn)樣（容易污染離子源）；

2）做聯(lián)用時(shí)最好分流（a可以使用常規柱，b縮短分析時(shí)間，c 延長(cháng)質(zhì)量分析器壽命）；

3）最好使用在線(xiàn)切換閥，降前每個(gè)樣品的前后1－2分鐘的流動(dòng)相切入廢液（避免樣品中的鹽進(jìn)入質(zhì)譜，做Sequence時(shí)可以把平衡柱子的流動(dòng)相切入廢液）；

4）開(kāi)始聯(lián)用前，直接運行質(zhì)譜數分鐘，可以先將溫度（毛細管溫度和離子源溫度（APCI））加熱到預設定值；

5）待機時(shí)將切換閥置于waste，避免剛開(kāi)液相時(shí)將流動(dòng)相打入離子源；

6）關(guān)機前毛細管的溫度先降下來(lái)，穩定一段時(shí)間后再關(guān)閉電源，避免風(fēng)扇停止轉動(dòng)后毛細管外圍的熱量向里擴散，容易引起內部線(xiàn)路及電子元器件老化加速；

7）每天清理毛細管口外部，擦洗干凈，每次停機時(shí)注意清洗Skimmer，用無(wú)塵擦拭紙，kimberly那種；

8）如果用的是鋼瓶而且天天做樣的話(huà)，將兩個(gè)鋼瓶并聯(lián)；

9）做定量時(shí)注意離子源噴針的具體位置，否則標準曲線(xiàn)就不能用了；

10）不要不經(jīng)過(guò)柱子分離進(jìn)行定量分析，結果不可靠（競爭性抑制目標分子離子化）；

11）如果是負離子檢測的話(huà)，可以相流動(dòng)相中加入少量異丙醇；

12）不要使用不揮發(fā)性鹽，如果使用揮發(fā)性鹽，但濃度不要超過(guò)20mmol/l；

13）需要使用酸的情況下可以用甲酸，乙酸，三氟乙酸可以用，但能用甲酸或乙酸時(shí)就別用TFA。

6、理論上液質(zhì)聯(lián)用禁止使用任何不揮發(fā)性的緩沖鹽，如果需要盡量使用諸如乙酸氨等揮發(fā)性鹽，濃度不要超過(guò)20mmol/l。 對于不揮發(fā)性的緩沖鹽，如果你的儀器有吹掃捕集的話(huà)也可使用，但一定要小心。萬(wàn)不得已也不要用，首先有不揮發(fā)鹽是得不到好的離子流的，其次鹽留在質(zhì)譜中很難除掉，除非停機清洗，不然一直會(huì )影響其他樣品的分析。

可以找質(zhì)譜友好的條件來(lái)做液質(zhì)聯(lián)機，例如色譜條件為20mM磷酸鹽的水/乙腈流動(dòng)相，做液質(zhì)聯(lián)機的時(shí)候就可以用醋酸銨代替，然后用醋酸調節pH值與磷酸鹽的一致即可。

除了難揮發(fā)的鹽，三乙胺、表面活性劑、還有高濃度（>0.5%）的TFA，都對質(zhì)譜不好，液質(zhì)聯(lián)用的流動(dòng)相中應該避免。