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    復旦團隊創(chuàng )建精準N糖蛋白質(zhì)組學(xué)分析方法

    [2017/9/7]

        復旦大學(xué)化學(xué)系教授楊芃原團隊、中科院計算技術(shù)研究所研究員賀思敏團隊、國家蛋白質(zhì)科學(xué)中心(上海)研究員黃超蘭團隊合作研究，創(chuàng )建了基于質(zhì)譜的高通量糖基化肽段分析方法pGlyco2.0，為精準N糖蛋白質(zhì)組學(xué)提供了新技術(shù)。今天，相關(guān)研究成果以《pGlyco2.0：基于綜合質(zhì)控和一步質(zhì)譜法的精準N糖蛋白質(zhì)組學(xué)糖肽分析方法》為題發(fā)表于《自然·通訊》。
    　　
    　　據悉，楊芃原、賀思敏和黃超蘭為共同通訊作者。楊芃原為該文的Lead Contact。
    　　
    　　糖基化是最復雜的蛋白后修飾之一。與其他蛋白后修飾相比，糖基化不但會(huì )產(chǎn)生宏觀(guān)不均一性(每個(gè)蛋白上可能有多個(gè)后修飾位點(diǎn))，更會(huì )產(chǎn)生海量的微觀(guān)不均一性(每個(gè)位點(diǎn)上可能有幾十甚至上百種不同的后修飾基團)。此外，糖鏈本身的離子化效率很低。這些因素的結合使得糖基化分析的通量和質(zhì)量遠低于蛋白質(zhì)組學(xué)的常規分析水平。
    　　
    　　這項研究通過(guò)深入研究和測試質(zhì)譜條件，開(kāi)發(fā)基于階梯能量的一步質(zhì)譜采集法，提高了糖肽鑒定的通量和開(kāi)發(fā)具有自主產(chǎn)權的pGlyco2.0糖肽檢索引擎，從糖鏈、肽段、糖肽三個(gè)層面對糖肽數據庫檢索進(jìn)行精確質(zhì)控，從而大幅提升了N糖蛋白質(zhì)組學(xué)分析的通量和質(zhì)量。
    　　
    　　同時(shí)，研究人員首次將重標元素應用于糖肽鑒定準確度分析，為該領(lǐng)域的質(zhì)控分析提供了新的方法及標準。
    　　
    　　專(zhuān)家表示，這項研究報道了目前最大的糖基化數據集：在1%的假陽(yáng)性率下，在小鼠的五個(gè)臟器種鑒定到了超過(guò)一萬(wàn)條N糖肽。
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