細胞污染的分類(lèi)、來(lái)源及預防污染的措施

如何打一場(chǎng)漂亮的細胞保衛戰？

細胞污染是細胞培養的大敵，預防和避免污染是細胞培養成功的關(guān)鍵。一旦輕敵就會(huì )前功盡棄，不僅浪費時(shí)間，而且浪費人力、物力，甚至造成無(wú)法彌補的損失。而且小編的童鞋也經(jīng)常向我抱怨：每到畢業(yè)季，就藍瘦，香菇是因為細胞死了一批又一批，畢業(yè)遙遙無(wú)期��！那么如何打一場(chǎng)漂亮的細胞保衛戰呢？下面就跟隨小編一起來(lái)學(xué)起來(lái)吧~

第一步：認識細胞培養過(guò)程中有哪些污染？

細胞培養污染是指培養環(huán)境中侵入了對細胞生存有害的成分和造成細胞變異的異物。體外細胞培養污染可分為三類(lèi)：物理性、化學(xué)性及生物性污染。

物理性污染：

物理性污染通過(guò)影響細胞培養體系中的生化成分，從而影響細胞的代謝。

物理性污染的來(lái)源：培養環(huán)境中的物理因素，如溫度、放射線(xiàn)、振動(dòng)、輻射（紫外線(xiàn)或熒光）會(huì )對細胞產(chǎn)生影響。

物理性污染的現象：細胞、培養液或其他培養試劑暴露在放射線(xiàn)、輻射或過(guò)冷過(guò)熱的溫度中，可以引起細胞代謝發(fā)生改變，如細胞同步化、細胞生長(cháng)受抑制，甚至細胞死亡。

化學(xué)性污染

化學(xué)性污染是一些對細胞有毒性的或對細胞產(chǎn)生刺激的化學(xué)物質(zhì)。

化學(xué)性污染的來(lái)源：

未純化的物質(zhì)、試劑、水、血清、生長(cháng)輔助因子及儲存試劑的容器都可能成為化學(xué)性污染的來(lái)源。細胞培養的必需養分（如氨基酸）若濃度超過(guò)了合理的范圍，也會(huì )對細胞產(chǎn)生毒性。同樣，不同細胞系在最佳培養條件下對血清和緩沖液的要求是不一樣的，在培養中應嚴格控制。

化學(xué)性污染的現象：化學(xué)性污染同樣會(huì )使細胞生長(cháng)受抑制，甚至細胞死亡。

生物性污染

生物性污染包括比較容易發(fā)現的細菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現的病毒、支原體和其他細胞的污染。

生物性污染的來(lái)源：

● 取材不慎或處理不當

● 空氣塵埃

● 消毒不嚴

● 操作不當

● 試劑尤其是血清污染

生物性污染的現象：

● 細菌：G+菌較多。

● 真菌：霉菌較多。

● 支原體：不易檢測。

● 病毒：由于病毒有種屬特異性，所以病毒污染的概率比較小。

第二步：做好預防污染措施

針對細胞污染的三個(gè)分類(lèi)，做好如下預防措施：

A.物理性污染的預防

● 實(shí)驗室的合理設計及建立規范的操作規程；

● 培養箱應放在恒溫的環(huán)境中；

● 培養液及試劑應放在固定位置，而且要注意避光，試劑周?chē)�不能放置同位素�?

● 從冰箱中取出的培養液應在室溫條件中放置一段時(shí)間后再進(jìn)行使用，以避免過(guò)冷的溫度對細胞的影響。

B.化學(xué)性污染的預防

● 使用的所有物質(zhì)都應是高純度的，同時(shí)正確配制和儲存培養液及試劑。

● 在配制液體和清洗容器時(shí)必須使用不含雜質(zhì)的超純水。

● 選用同一批次的血清。

● 在選用器皿時(shí)，根據被培養細胞的生長(cháng)特性、培養方式和所用培養液的性質(zhì)來(lái)選用適合的器皿來(lái)達到實(shí)驗的準確性和可靠性。

C.生物性污染的預防

● 建立規范的無(wú)菌操作程序及各種規章制度，并嚴格執行。

● 控制環(huán)境污染，同時(shí)注意實(shí)驗人員的防護及無(wú)菌服的潔凈和無(wú)菌。

● 保證細胞培養基和器材無(wú)菌。

● 在細胞培養基中加入適量的抗生素。

預防是防止細胞培養過(guò)程中發(fā)生污染的最好辦法。只有提前做好預防工作，才能將發(fā)生

污染的可能性降到最小程度。