免疫測定在臨床檢驗中的應用

　　1.酶免疫測定（enzyme immunoassay）：可分為均相（homogenous）和非均相（heterogenous）兩種類(lèi)型。在均相EIA中可不需進(jìn)行游離的和結合的標記物的分離而直接測定標記物。例如在某種條件下，抗原抗體反應后形成的酶標記抗原抗體復合物中的酶失去其對底物作用的活力，因而測出的酶活力直接反映游離的酶標記物。均相EIA在臨床檢驗中較少應用。非均相EIA需先進(jìn)行游離的和結合的標記物的分離。如前所述，固相載體可用作一種分離手段。

　　2.免疫測定在臨床檢驗中的應用：由于各種抗原成份，包括小分子的半抗原，均可用以制備特異性的抗血清或單克隆抗體，利用此抗體作為試劑就可檢測標本中相應的抗原，因此免疫測定的應用范圍極廣，在臨床檢驗中可用于測定：
　　1）體液中的各種蛋白質(zhì)，包括含量極少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等。
　　2）激素，包括小分子量的甾體激素等。
　　3）抗生素和藥物。
　　4）病原體抗原，HBsAg、HBeAg等。
　　5）另外，也可利用純化的抗原檢測標本中的抗體，例如抗-HBs等。

　　3．標記的免疫測定：如上所述，免疫測定是一種很敏感的測定方法，抗原抗體反應后直接測定形成的沉淀或濁度，敏感度可達5~10μg/ml，但在臨床檢驗中，某些待測物在標本中的含量遠低于這一水平，因此要尋找增加敏感度的方法。標記的免疫測定是將檢測試劑中的抗原或抗體用可微量測定的物質(zhì)加以標記，通過(guò)測定標記物來(lái)提高敏感度。在放射免疫測定和酶免疫測定中，標記物分別為放射性核素和酶，最后用測定放射性和酶活力來(lái)計算待檢物的量，敏感度可比直接測定沉淀物提高數百至數千倍。在標記免疫測定中，一般加入過(guò)量的標記試劑以保證與待測物徹底反應。以標記抗體（Ab※）檢測抗原（Ag）為例，反應式如下：Ag+Ab※→AgAb※+Ab※
　　在反應產(chǎn)物中有與Ag結合的Ab※和游離和Ab※，如不將兩者分離而測定標記物，測得的結果將為兩者之和。因此，游離標記物與結合標記物的分離是標記免疫測定中的重要步驟�？刹捎枚喾N手段，固相載體是其中之一。如將抗原或抗體包被在固相載體上，然后再與標記的抗原或抗體直接反應，結合的標記物被固定在載體上，而游離的標記物留于溶液中。這樣可以通過(guò)洗滌將游離的Ab※除去，結合標記物的測定可在固相上進(jìn)行。