細胞培養板的密閉和污染問(wèn)題

　　細胞培養板的加樣和操作：細胞培養板在進(jìn)行細胞操作時(shí)同樣遵循嚴格無(wú)菌的原則，各項操作要保證規范、科學(xué)，不對細胞的生長(cháng)造成額外的影響。這其中最常見(jiàn)的問(wèn)題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長(cháng)狀態(tài)的影響。

　　問(wèn)：96，24孔培養板或培養皿的蓋子都很松，這樣是方便了透氣，但是細菌、霉菌等污染物會(huì )不會(huì )也隨著(zhù)溜進(jìn)去呢?

　　答：

　　1.蓋子很松，屬于半開(kāi)放培養，這樣的目的是透氣(實(shí)際上是為了使培養皿外的co2能夠與培養皿充分交換，維持培養基的pH值)。

　　2. 凡事有利必有弊，這樣當然增加了污染的可能性。此外這樣還會(huì )使培養皿內的液體蒸發(fā)，這對于精確定量的藥物來(lái)說(shuō)就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的 a培養箱內空氣必須清潔(定期紫外線(xiàn)照，酒精擦洗，盡量少開(kāi)關(guān)培養箱)b培養箱內的濕度必須始終保持為100%(培養箱內放置無(wú)菌蒸餾水的水槽)。

　　就好像培養皿，也是一個(gè)蓋倒扣的容器，也不會(huì )污染。主要是因為蓋子“L”型邊緣產(chǎn)生氣流負壓的緣故，灰塵上面才附著(zhù)有微生物，而氣流攜帶的灰塵是無(wú)法通過(guò)產(chǎn)生負壓的蓋邊緣的。而透氣作用只是通過(guò)空氣的擴散，不會(huì )產(chǎn)生氣流，所以只會(huì )透氣不會(huì )透菌。

　　我使用24孔板，在其中的某些孔中有操作(在超凈臺內)，而其他孔中還有細胞要培養.我很擔心這樣會(huì )污染，不知道要注意什么?大家不知道有什么好的建議。

　　在超凈臺內如果操作規范的話(huà)應該可以的，我想你可以充分利用培養版的蓋子，盡量只暴露要操作的孔，將其他孔用蓋子蓋起來(lái)。這是我的一點(diǎn)粗淺的見(jiàn)解，拋磚引玉吧!

　　使用前綜合考慮一下，充分使用所以的孔;如果只需要使用少數的孔可以只用一邊的，其余用蓋子蓋住，我習慣于先用右側的孔(右手加樣方便)。

　　其實(shí)自己感覺(jué)只要注意無(wú)菌操作，一般是不會(huì )污染的。操作時(shí)用幾塊玻片把板子一側墊高，不要把蓋子全打開(kāi)，一般沒(méi)問(wèn)題。