食品微生物實(shí)驗室規劃設計方案

　　食品微生物實(shí)驗室規劃設計方案

　　一、選址：

　　實(shí)驗室應選擇在清潔安靜的場(chǎng)所，遠離生活區，鍋爐房與交通要道;實(shí)驗室應選擇在光線(xiàn)充足，通風(fēng)良好的場(chǎng)所，要與生產(chǎn)加工車(chē)間有一定距離;實(shí)驗室應選擇在方便扦樣與檢驗，距離車(chē)間較近的工作場(chǎng)所。

　　二、結構和布局：

　　根據生產(chǎn)實(shí)際需要，一般工廠(chǎng)應設置細菌與理化檢驗兼有的綜合實(shí)驗室，主要包括以下三大部分：細菌實(shí)驗室、理化實(shí)驗室、辦公室。

　　1. 辦公室

　　理化分析實(shí)驗室：(或者和細菌檢驗操作室合并)

　�、倮砘�分析室(兼作感觀(guān)檢驗室)

　�、趦x器室(兼放細菌室顯微鏡等少量?jì)x器)

　　細菌實(shí)驗室：

　�、偌毦鷻z驗操作室;

　�、跓o(wú)菌室;

　�、叟囵B基制作室;

　�、芟礈煜�毒室;

　　一般布局要求如下：

　　1. 辦公室：辦公室是化驗人員進(jìn)行原始記錄等各項工作的場(chǎng)所，是與非化驗室人員交往較多的場(chǎng)所，因此，應設在整體綜合化驗室的最外層，只需有桌、椅等簡(jiǎn)單設施即可。

　　2. 細菌檢驗操作室(常規操作)細菌檢驗操作室是細菌培養與檢驗主要操作室，主要設施是實(shí)驗臺。

　　對實(shí)驗臺的要求：

　　a.實(shí)驗臺面積一般不小于2.4×1.3m;

　　b.實(shí)驗臺位置應在實(shí)驗室中心位置，要有充足光線(xiàn);也可以做邊臺。

　　c.實(shí)驗臺兩側安裝小盆與水龍頭;

　　d.實(shí)驗臺中間設置試劑架，架上裝有日光燈與插座;

　　e.實(shí)驗臺材料要以耐熱、耐酸堿為宜。

　　3. 無(wú)菌室：無(wú)菌室通過(guò)空氣的凈化和空間的消毒為微生物實(shí)驗提供一個(gè)相對無(wú)菌的工作環(huán)境，無(wú)菌室是處理樣品和接種培養的主要工作間，應與細菌檢驗操作室緊密相連。為滿(mǎn)足無(wú)菌室無(wú)菌要求，無(wú)菌間應滿(mǎn)足以下布局：

　　入口避開(kāi)走廊，設在細菌檢驗操作室內;

　　b.與操作室用兩道緩沖間隔開(kāi);

　　c.無(wú)菌室與緩沖間均裝有紫外燈，要求每3平米安裝30w紫外燈一盞;

　　d.無(wú)菌室內設有實(shí)驗臺中央(實(shí)驗臺與邊臺皆可)，紫外燈距實(shí)驗臺面要小于1.5m;

　　e.無(wú)菌室與操作室之間設有雙層窗構成小通道。

　　4. 培養基制作室：培養基室是制作、配制微生物培養所需培養基及檢驗用試劑的場(chǎng)所，其主要設備應為邊臺與藥品柜。

　　a.邊臺上要放置電爐，以滿(mǎn)足熔化煮沸培養基時(shí)用;

　　b.邊臺材料要耐高熱、耐酸堿;

　　c.藥品柜分門(mén)別類(lèi)存放一些一般藥品及試劑;

　　d.危險、易腐易燃有毒有害藥品單獨設保險柜存放;

　　e.邊臺上要放天平，以稱(chēng)取藥品用。

　　5. 洗滌消毒室：洗滌消毒室用以消毒洗滌待用與已用之玻璃器皿，培養基及污物，其面積應大于10m2 。

　　為滿(mǎn)足洗滌消毒的功能，洗滌消毒室應設有：

　　a.1-2個(gè)洗滌池，洗滌池上下水網(wǎng)要暢通;

　　b.器皿柜或實(shí)驗臺，以放置洗滌好器皿;

　　c.高壓滅菌鍋，其所用電源應滿(mǎn)足用電負荷;

　　d.室內安有通風(fēng)裝置(通風(fēng)柜)或換氣扇;

　　e.有條件的單位還可在該室內，設供日常檢驗用水蒸餾水器裝置。

　　6. 理化分析室：(如果沒(méi)有條件，這個(gè)可以和微生物常規實(shí)驗室合并)理化分析室是物理化學(xué)分析的主要操作室。

　　a.實(shí)驗臺與細菌操作室要求相同

　　b.設置通風(fēng)柜以滿(mǎn)足加熱、消化、干燥、燒灼和化學(xué)處理等工作需要;

　　c.洗滌池。

　　7. 儀器室：如果沒(méi)有條件，這個(gè)可以和微生物常規實(shí)驗室合并，用以放置顯微鏡、電子天平及理化分析用小型儀器;

　　要求清潔干燥、防潮防蟲(chóng)、避光;

　　b.儀器臺要穩固、牢靠。

　　對于小的企業(yè)實(shí)驗室，如果沒(méi)有更多的房間進(jìn)行區分，應該可以通過(guò)規劃房間分區，以保證實(shí)驗室不同工作區(潔凈區和一般操作區)之間有一定區分,因此，最少應保證4個(gè)房間或者4個(gè)分區。

　　1.洗刷消毒區域，這個(gè)區域要求相對獨立，最好以房間間隔，因為這個(gè)區域處理廢物，有一定的污染和濕度。

　　2.培養基配制區域，用于培養基的配制，經(jīng)常有水等，需要相對獨立一些。

　　一般操作區域，這個(gè)是主要操作區域，微生物的試驗結果的觀(guān)察，顯微鏡操作，一般的簡(jiǎn)單理化操作，儀器設備等，都可以合并在這個(gè)房間或者區域進(jìn)行。

　　無(wú)菌操作區域，無(wú)菌間，這個(gè)要求獨立。

　　微生物實(shí)驗室分區及基本要求

　　良好的自然通風(fēng)，必要時(shí)應配備抽風(fēng)機。接種、分離及鑒定細菌等操作應在生物安全柜中進(jìn)行，對結核桿菌等傳染性極強的微生物學(xué)檢驗時(shí)必須在100 %外臨床微生物學(xué)實(shí)驗室接觸多種有害微生物，為了防止交叉污染，保護工作人員健康，實(shí)驗室應至少劃分成3個(gè)區。

　　一、清潔區

　　包括辦公室、休息室、培養基配制室與試劑儲藏室。此區域禁止帶人細菌檢驗標本。

　　二、操作區

　　(1)整潔：微生物操作區是各種病原菌相對集中的地方，為了減少粉塵流動(dòng)，防止交叉污染，操作區應與外界分開(kāi)。實(shí)驗室工作人員進(jìn)入操作區應換鞋，送標本人員不進(jìn)入操作區，操作區地面用專(zhuān)用拖把每天拖1 次，每周用消毒劑擦洗1 次。每天早上工作前，用紫外線(xiàn)照射30 min ，或每天工作后，用紫外線(xiàn)照射60 min ，對整個(gè)操作區進(jìn)行消毒;下午工作結束后用消毒液消毒工作臺面，以保證工作環(huán)境的安全清潔。

　　(2)光線(xiàn)：細菌培養的細小菌落及血清試驗凝集顆粒的觀(guān)察， 都需要有充足的光線(xiàn)。操作區除設置常規照明燈外，還必須安裝操作臺燈，以保證實(shí)驗結果的正確判斷。

　　(3) 通風(fēng)：由于各種病原菌集中，空氣污濁，實(shí)驗室要求保持排的生物安全柜中進(jìn)行。

　　(4)溫度和濕度：由于無(wú)菌操作的要求，實(shí)驗過(guò)程中經(jīng)常使用酒精燈，因此，微生物學(xué)實(shí)驗室不能安裝吊扇。為了達到實(shí)驗所需的適宜溫度，尤其是滿(mǎn)足某些儀器對溫度濕度的要求，實(shí)驗室應安裝空調。

　　(5)電源：要求提供穩壓、恒頻的電源;根據儀器設備要求，必要時(shí)配備不間斷電源。

　　(6)水源：操作區內須設置水源。用于標本處理(如細菌染色) 的水槽與工作人員洗手用的水槽不能混用。

　　(7)污染物處理：操作區須備有消毒缸，以處理沾有活菌的玻片等污染物品。檢驗剩余的標本及使用過(guò)的帶菌平板、試管均須集中地點(diǎn)安全放置，經(jīng)消毒滅菌處理后再洗滌或丟棄。

　　三、無(wú)菌區

　　(1)無(wú)菌室應完全封閉，進(jìn)出無(wú)菌室至少要經(jīng)兩道門(mén)，中間隔有緩沖間，無(wú)菌室與外間設置一個(gè)可開(kāi)閉的窗口，用于傳遞器具。

　　(2)無(wú)菌室必須保持整潔。工作人員進(jìn)入無(wú)菌室應換專(zhuān)用鞋、專(zhuān)用衣。無(wú)菌室使用前須用紫外線(xiàn)消毒30 min ，操作結束后清潔臺面，再用紫外線(xiàn)消毒30 min 。定期用乳酸或甲醛熏蒸，徹底消毒。

　　(3)無(wú)菌室僅用于培養基分裝等無(wú)菌操作，不能進(jìn)行有菌標本的操作。操作人員操作時(shí)應嚴格關(guān)門(mén)，并戴好專(zhuān)用的口罩、帽子。

　　(4)無(wú)菌室內應有空氣過(guò)濾裝置，并安裝空調。

　　食品微生物實(shí)驗室必備設備

　　一、無(wú)菌室和超凈工作臺

　　是實(shí)驗室的核心部分，主要為樣品提供保護，保證實(shí)驗結果的準確和人員的安全。

　　(一)無(wú)菌室

　　無(wú)菌室通過(guò)空氣的凈化和空間的消毒為微生物實(shí)驗提供一個(gè)相對無(wú)菌的工作環(huán)境。無(wú)菌室的主要組成設備的空氣自?xún)羝�，傳遞窗，紫外線(xiàn)燈等。嚴格的無(wú)菌室可能還裝備風(fēng)彬室等。

　　(二)超凈工作臺

　　超凈工作臺作為代替無(wú)菌室的一種設備，使用簡(jiǎn)單方便，為實(shí)驗的開(kāi)展提供一個(gè)相對無(wú)菌的操作臺。超凈工作臺灣隊根據風(fēng)向分為水平式和垂直式。

　　二、培養箱

　　主要用于實(shí)驗室微生物的培養，為微生物的生長(cháng)提供一個(gè)適宜的環(huán)境。

　　(一)普通培養箱：一般控制的溫度范圍為：室溫+5～65度，又分為電熱恒溫培養箱和隔水式恒溫培養箱。

　　(二)生化培養箱：一般控制的溫度范圍為：5～50度。

　　(三)恒溫恒濕箱：一般控制的溫度范圍為：5～50度，控制的濕度范圍為：50～90%�？勺鳛槊咕�培養箱。

　　(四)厭氧培養箱：適用于厭氧微生物的培養。

　　三、電熱干燥箱：用于吸管，平皿類(lèi)玻璃器皿的干熱、滅菌和烘烤。

　　四、高壓蒸汽滅菌器(又叫高壓滅菌鍋)：物品的滅菌。

　　五、天平：一般要求具備精度達到萬(wàn)分之一的分析天平。

　　六、顯微鏡：觀(guān)察細菌形態(tài)和動(dòng)力、微生物和微小物品結構的必備儀器。

　　七、分光光度計：在QS中用于生產(chǎn)方便面，茶飲料，肉制品，乳制品，棉白糖的企業(yè)。

　　八、酸度計：在QS中用于生產(chǎn)果蔬罐頭，白沙糖，飲用水類(lèi)的企業(yè)。

　　九、電導率儀和濁度儀:在QS中用于生產(chǎn)飲用水的企業(yè)。

　　十、折光儀:在QS中用于生產(chǎn)果蔬罐頭，飲料類(lèi)的企業(yè)。

　　十一、恒溫水溫浴鍋:在QS中用于部分培養溫度需要水浴(如大腸桿菌檢驗)生產(chǎn)方便面，速凍面米食品企業(yè)。

　　十二、定氮裝置:在QS中用于生產(chǎn)乳制品，含蛋白質(zhì)飲料的企業(yè)。

　　雜質(zhì)度過(guò)濾機:在QS中用于生產(chǎn)乳品企業(yè)。

　　均質(zhì)器：用于均質(zhì)樣品，有旋轉刀片式和拍擊式可以選擇。

　　冰箱

　　常規玻璃器皿

　　一、 吸管：用于吸取少量液體，常用的吸管為0.1刻度1mL及1.0刻度的10mL吸管。

　　二、培養皿：為硬質(zhì)玻璃雙碟，常用于分離培養，蓋與底大小應合適，常用規格為90mm。

　　三、三角燒瓶與廣口瓶：多用于盛培養基及配制溶液，常用的規格有250mL、500mL、1000mL。

　　四、燒杯：供盛液或煮沸用，常用的規格為100mL、250mL、500mL、1000mL

　　五、量筒：用于液體測量，常用規格為100mL、250mL、1000mL

　　六、試管：用于細菌培養，有多種規格。

　　七、載玻片蓋玻片：細菌涂片觀(guān)察用。

　　八、試劑瓶：裝試劑用，常用棕色避光

　　九、其它，如試管架、毛刷、酒精燈、接種針、接種環(huán)等

　　實(shí)驗室配套常用設備

　　一、通風(fēng)柜

　　二、離心機

　　三、純水器

　　四、烘箱

　　五、低溫冰箱實(shí)驗室常用消耗品(凈化工作臺)

　　六、其他

　　(一)實(shí)驗室耗材(槍頭)、振蕩器、菌落計數器、電位 pH計、高速離心機、離心管、試管、巴氏吸管、槍頭盒、培養皿、細胞培養板、酶標版、過(guò)濾器、移液管、接種環(huán)、接種針、比色皿、培養板、PCR管、量筒燒杯。

　　(二)常用設備，如鐵架臺、升降臺、滴定臺、鑷子、攪拌子、各種刷子、藥勺、濾紙、三腳架、支架，等等。

　　五、化學(xué)試劑和培養基

　　化學(xué)試劑和培養基：參照所執行標準后面的附錄購買(mǎi)所需試劑和培養基，目前所用多為合成干粉培養基，試劑也可以購買(mǎi)到標準配套試劑。

　　實(shí)驗室配套常用試劑

　　營(yíng)養瓊脂，乳糖膽鹽發(fā)酵培養基，乳糖發(fā)酵培養基，伊紅美藍瓊脂等。

　　微生物實(shí)驗室基本設備的質(zhì)控要求

　　(1)孵箱：根據需要設置溫度，可調溫度范圍應由室溫至60℃。孵箱溫度允許的波動(dòng)幅度為設置溫度±1℃，如一般細菌培養，孵箱溫度應為35℃±1℃。應每天記錄孵箱溫度，定期加水，每月清潔內壁和架子。

　　(2)冰箱和低溫冰箱：普通冰箱允許溫度為4℃±2℃，每天記錄溫度，并定期清潔。盡量減少冰箱開(kāi)啟次數，減少溫度的波動(dòng)。低溫冰箱控制溫度-20℃±5℃，每天觀(guān)察溫度并記錄，每隔3個(gè)月除霜1次。一旦溫度失控，及時(shí)調整。

　　(3)水浴箱：根據需要設置溫度，允許的溫度波動(dòng)幅度為0.5℃，每日檢查水位，記錄溫度。每月擦拭箱體內部并換水。

　　(4)高壓滅菌器：控制溫度121℃，每次使用前觀(guān)察并調整水位，記錄使用時(shí)間、溫度或壓力。每周用嗜熱芽孢桿菌檢測滅菌效果，每月清理內部及換水，并定期檢測密封圈的密封效果。

　　(5)二氧化碳培養設備：常用的有二氧化碳箱和蠟燭罐，要求二氧化碳濃度為5%～10%，箱內或罐內保持濕度，并用淋病奈瑟菌作培養效果監測。

　　(6)厭氧培養設備：主要有厭氧箱、厭氧罐、厭氧袋�；旌蠚怏w組分要求二氧化碳10%、氫氣10%和氮氣80%。厭氧箱與厭氧罐內部要每周清潔，定期更換催化劑。每次使用培養設備均應用美藍指示劑或銅綠假單胞菌檢測厭氧效果。

　　(7)天平：保持刀刃光滑而鋒利、稱(chēng)盤(pán)清潔，并定期校正。

　　(8)pH計：要求誤差不超過(guò)0.02，并定期校正。

　　(9)顯微鏡：最常用的是光學(xué)顯微鏡，應注意保護油鏡。每次使用后應用擦鏡紙擦去油鏡頭上的鏡油。每天工作結束后，應用含少量(或酒精)的擦鏡紙擦拭油鏡，再用潔凈擦鏡紙擦干。另外，微生物學(xué)實(shí)驗室還用到暗視野顯微鏡、熒光顯微鏡等，均應按規程清潔和保養。

　　(10)玻璃器皿：微生物學(xué)實(shí)驗室所用試管、吸管、平皿等應潔凈無(wú)菌，不殘留酸堿。

　　(11)接種器具：分為接種針和接種環(huán)兩種。應選用傳熱散熱快、耐用和不生銹的材料，早先使用的白金絲由于價(jià)格昂貴，目前多用比較經(jīng)濟的鎳鉻絲代替。一般要求接種環(huán)長(cháng)5～8cm、直徑2～4mm，定量接種環(huán)要定期校正其容量，接種針長(cháng)5～8cm。

　　設備控制標準保養及監測

　　高壓滅菌器溫度≥121℃每次用前換水;每月清潔1次。

　　孵育箱溫度35℃±1℃每天記錄溫度;每月清潔內壁和隔板。

　　水浴箱溫度37 ℃±0.5℃每天記錄溫度;每月擦內壁和換水。

　　冰箱溫度4℃±2℃每天記錄溫度;保持清潔并定期除霜。

　　低溫冰箱溫度-20℃±5℃每天記錄溫度;保持清潔并定期除霜。

　　二氧化碳培養箱:二氧化碳5%～10%,每天記錄溫度;定期換水;用淋病奈瑟菌監測效果。

　　厭氧培養箱:二氧化碳10%、氫氣10%、氮氣80%,每次使用時(shí)用厭氧指示劑監測效果。

　　微生物標本采集、運送與處理原則

　　標本的正確采集、運送與處理對于細菌的培養、鑒定，有著(zhù)十分密切的關(guān)系。

　　一、標本采集

　　(1)送檢申請單必須惟一標識，并注樣品名稱(chēng)、型號、年月、性狀、標本來(lái)源、采集時(shí)間、檢驗目的及添加物使用情況等，以便實(shí)驗室能針對該標本選用相應培養基和適宜培養環(huán)境，有利于對檢驗結果的綜合評估。

　　(2)為避免漏檢，確保病原體的檢出，應盡量在抗菌藥劑使用前采集標本。

　　(3)標本采集時(shí)應嚴格執行無(wú)菌操作，減少或避免機體正常菌群及其他雜菌污染。

　　(4)以棉拭子采集標本，如拭子，應插入運送培養基送檢。

　　(5)混有正常菌群的標本，如拭子，不可置肉湯培養基內送檢。

　　(6)盛標本容器須經(jīng)滅菌處理，但不得使用消毒劑。

　　(7)實(shí)驗室應制定各種送檢標本的采集、運送、保存等正確方法和注意事項，并應向取樣者詳細介紹如何正確留取和送檢標本。

　　二、標本運送

　　標本采集后應立即送至微生物學(xué)實(shí)驗室。標本采集后在室溫下超過(guò)2h未送達實(shí)驗室者可視為不合格標本。生產(chǎn)線(xiàn)邊檢驗可提高病原菌檢出率，送檢標本必須與檢驗申請單有相同的惟一標識。

　　三、標本驗收

　　實(shí)驗室只能接收和處理合格的檢驗標本，因此應制定不合格標本拒收標準;對不合格標本應注明原因，退回，并做記錄。

　　四、標本處理

　　(1)實(shí)驗室收到標本后，應立即根據標類(lèi)型及檢驗目的，選擇合適的培養基接種。

　　(2)混有正常菌群的標本，應作定量細菌培養。不能精確定量或常規定量操作較困難的標本，分離出致病菌及條件致病菌為優(yōu)勢菌時(shí)，應作細菌鑒定及藥敏試驗，同時(shí)注明細菌量化指標。

　　(3)對已用抗菌藥物治療的標本，可在培養基中加入某些物質(zhì)以中和藥物對細菌的抑制作用

　　微生物檢驗標本的采集

　　樣品在使用抗生素前，將標本采集在無(wú)菌容器內，立即送到檢驗科細菌室，特殊檢驗應先與細菌室聯(lián)系，再按要求采集標本，并立即送檢。

　　(一)樣品的采集：

　　1.憑檢驗申請單到檢驗科領(lǐng)取血培養瓶。

　　2.采取樣品部位和血培養瓶口應嚴格消毒。

　　3.通常一般至少作三次血培養，在抗菌藥已實(shí)施者，更應增加培養次數，懷疑特定菌種一般應一日作三次培養，必要時(shí)需追加次數。

　　4.應在生產(chǎn)高峰時(shí)采集。

　　5.對疑為細菌性污染的產(chǎn)品，嚴格消毒后抽取2～3 ml作增菌培養。

　　6.每次采樣量5-10ml，培養基與樣品之比以10∶1為宜，以稀釋樣品中的菌物質(zhì)。

　　7.采樣過(guò)程應嚴格無(wú)菌操作，避免污染。

　　培養基質(zhì)量控制

　　一、配制時(shí)的質(zhì)量控制

　　(1)容器：配制和分裝培養基的燒瓶、平皿或試管等器材應為中性，無(wú)酸、堿抑制物殘留，平皿底部要平，以免瓊脂厚薄不一，影響藥敏試驗結果。

　　(2)成分來(lái)源：各種成分來(lái)源可靠，不含對目的菌生長(cháng)有抑制的物質(zhì)。特殊要求的培養基，如葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(O/F 試驗)，除加入葡萄糖外，不能含有其他糖類(lèi)，指示劑不能用乙醇溶液，避免O/F試驗的假陽(yáng)性。培養基配制用水應是蒸餾水。

　　(3)pH值調整：根據培養基的不同要求調整pH 值，控制在要求范圍的±0.2之內。應當注意，培養基在高壓滅菌后其pH 值降低0.1～0.2，故矯正時(shí)應比實(shí)際需要p H值高0.1～0.2。

　　(4)滅菌：根據培養基所含成分及配制數量的不同，選擇不同的滅菌方式，既要達到滅菌效果，又不破壞培養基成分。一般對穩定的培養基，如MH瓊脂、營(yíng)養瓊脂可用高壓滅菌，即121℃15min ;而含糖的培養基則以108℃滅菌為好，以防止糖類(lèi)破壞。不耐高熱的物質(zhì)如血清、牛乳等，可采用間隙滅菌法滅菌。

　　(5)分裝：根據使用的目的和要求決定分裝量。分裝培養基所用的平皿、試管要求清潔，不殘留酸堿;制備平板培養基時(shí)，操作臺要水平，以避免瓊脂平板厚薄不一，同時(shí)確保無(wú)菌操作。

　　二、配制后質(zhì)量控制

　　(1)培養基外觀(guān)情況：包括顏色、透明度、有無(wú)沉淀和凝固。如發(fā)現培養基表面有裂紋或與培養皿的邊緣分離，說(shuō)明培養基有脫水現象，必須丟棄。

　　(2)無(wú)菌試驗：每一批配好的培養基均須進(jìn)行無(wú)菌試驗。先滅菌后分裝的培養基，可采用抽樣方法試驗，少于100個(gè)樣本通常選取5%～10%的量，如果配制大量培養基，則任意選取10 個(gè)培養基;無(wú)菌分裝培養基則需全部做無(wú)菌試驗。樣本在35 ℃ 或其他適宜的溫度下隔夜培養，如培養基含有血液，則需再置于室溫1天，以檢查嗜冷菌。選擇性培養基因含有抑制物質(zhì)，能抑制許多微生物，因此，可加入10倍量的無(wú)菌液體培養基，稀釋抑制物質(zhì)，以利于檢出污染菌。即使做過(guò)無(wú)菌試驗，接種時(shí)，也要檢查每個(gè)平板上的可見(jiàn)菌落。

　　(3)性能測試：每一批新制或新購的培養基，使用前均須取已知性質(zhì)的庫存菌種進(jìn)行性能測試。培養基按目的不同可分為增菌培養基、分離培養基和鑒定培養基。

　�、僭鼍�培養基：接種少量難以生長(cháng)的細菌，在一定時(shí)間內觀(guān)察增菌情況，細菌能生長(cháng)的最小接種濃度越小，說(shuō)明增菌培養基性能愈好。

　�、诜蛛x培養基：要求目的菌生長(cháng)良好，非目的菌被抑制。一般要求生長(cháng)的目的菌接種量不可過(guò)多，較好的方法是將測試菌調成0.5麥氏濁度的菌懸液，再用0.001ml的標準接種環(huán)涂劃在培養基上，觀(guān)察菌落生長(cháng)。

　�、坭b定培養基：應選擇具有典型特征的菌株作性能試驗。如三糖鐵瓊脂，須用弗勞地枸櫞酸桿菌、福氏志賀菌及銅綠假單胞菌3種菌分別接種3支培養基，若反應結果為斜面產(chǎn)酸/高層產(chǎn)酸、硫化氫陽(yáng)性，斜面產(chǎn)堿/高層產(chǎn)酸，斜面產(chǎn)堿/高層產(chǎn)堿，質(zhì)量才算合格。

　　試劑、染色液和血清質(zhì)量控制

　　一、試劑

　　各種試劑配好后，均應注明試劑名稱(chēng)、配制日期、有效期及配制者，并作記錄，商品試劑亦應注明購入日期及有效期。配制好的試劑均應用標準菌株作性能測試，不合格者不能使用。性能測試間隔可根據試劑的穩定性和使用頻率而定，如氧化酶試劑每天用前測試，靛基質(zhì)試劑每周測試1 次。試劑須根據不同要求作適當的貯存，如氧化酶試劑應置棕色瓶中4 ℃冰箱保存。

　　二、染色液

　　常用染色液如革蘭染色液在每次配制后并常規至少每周檢測1次，用標準菌株金黃色葡萄球菌(ATCC25923)和大腸埃希菌(ATCC 25922)作陽(yáng)性和陰性檢測。不常用染色液(如鞭毛染色液)應于每次使用前，用已知特征的菌株作檢測。

　　3.診斷血清

　　診斷血清的使用和保存必須按說(shuō)明要求執行，一般置4℃冰箱貯存，且不得暴露室溫過(guò)久;使用前應注意有效期及效價(jià)，第一次使用抗血清時(shí)應用相應的菌株檢查其有效性，以后每月檢測1次。如抗血清出現任何顏色的改變或混濁，即不能使用。

　　微生物檢驗標本及檢驗結果質(zhì)量控制

　　一、微生物檢驗標本質(zhì)量控制

　　正確采集和處理標本是實(shí)驗室檢查獲得正確結果的前提，目前仍有不少實(shí)驗室和檢驗人員對檢驗標本分析前質(zhì)量控制的重視不夠。對標本采集方法和時(shí)間、標本來(lái)源，實(shí)驗室人員雖然不能直接控制，但有責任人員正確采集標本，可采取集中講課、個(gè)別輔導作取標本示教等方式給予指導。同時(shí)控制影響檢驗質(zhì)量的其他因素，如檢驗標本的運送、儲存和處理等，均應統一按正確的操作規程執行。

　　二、微生物檢驗結果質(zhì)量控制

　　1.檢驗結果報告

　　微生物學(xué)檢驗結果報告單是反映微生物學(xué)檢驗水平的重要依據之一。報告單填寫(xiě)要準確、規范，將微生物學(xué)檢驗技術(shù)上的新進(jìn)展充分反映在報告單上，如細菌名的更改，新的耐藥原因導致的藥敏結果修正等。每一份報告單發(fā)出前都要由專(zhuān)人審核，包括檢查項目是否遺漏、結果有無(wú)明顯錯誤、字跡是否清楚、檢驗者有無(wú)蓋章簽名等。核對后蓋上審核章，才能將報告單正式發(fā)出。同時(shí)，微生物學(xué)實(shí)驗室應實(shí)行分級報告制度，將標本顯微鏡檢查的初級結果報告生產(chǎn)部門(mén)，并進(jìn)行初級試驗，為早期解決質(zhì)量問(wèn)題提供依據。

　　2.檢驗結果記錄

　　實(shí)驗室應制定實(shí)驗結果登記制度和原始記錄，包括取樣資料，細菌的分離、鑒定及培養結果，培養基和試劑的配制記錄。以備產(chǎn)品檢驗報告單遺失或結果有疑問(wèn)時(shí)查考。詳細的結果記錄，有利于定時(shí)統計、分析和總結產(chǎn)品感染菌的類(lèi)型及其他情況，及時(shí)通報其他部門(mén)，指導生產(chǎn)原料的使用和采購。