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    提高轉染實(shí)驗效率的注意事項

    [2014/1/7]

      關(guān)于轉染體系的關(guān)鍵組分對細胞轉染實(shí)驗的效率有何影響,給予您一些關(guān)于如何使它們更有利于您研究方面的提示,DNA轉染如何提高轉染實(shí)驗成功率。

      成功轉染第一步,細胞培養注意事項。有時(shí)需要根據細胞系來(lái)選擇合適的轉染方法;而有時(shí)一些啟動(dòng)子在不同的細胞系中表現的功能也不同。這些都是設計實(shí)驗時(shí)需要考慮的因素,姑且不論。不過(guò)因為受限于特定的細胞,如何選擇合適的轉染方法就值得考究了。

      成功轉染第二步,質(zhì)粒的因素。啟動(dòng)子的選擇對于轉染基因的有效表達是非常重要的。對于轉染過(guò)程本身雖然無(wú)甚影響,但是對轉染結果卻有著(zhù)微妙的影響。

      RNA\siRNA\Oligo轉染注意事項:轉染時(shí)的細胞匯合度常常會(huì )比DNA轉染高一點(diǎn),也許是因為RNA轉染表達比DNA快?RNA轉染的用量必須參考轉染試劑說(shuō)明,因為RNA和轉染試劑的比例決定了轉染復合物的結構和凈電荷,以及是否容易被細胞膜吸附和內吞。RNA少了固然表達不好,太多也會(huì )有毒性的問(wèn)題。

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