暗視野顯微鏡和倒置顯微鏡的判斷

  (一)倒置顯微鏡

  在細胞培養、組織培養和微生物研究中，常用倒置顯微鏡進(jìn)行觀(guān)測，其光路原理如圖3—25所示�？吕�照明系統的光源(1)發(fā)出的光線(xiàn)經(jīng)聚光器(2)后照亮標本(4).3為孔徑光鬧，(13)則為機場(chǎng)光闊。標本經(jīng)物鏡組(5)、轉像系統(6，7，8，9，10，11)后成像在目鏡(12)的物方焦平面上，人眼通過(guò)目鏡組進(jìn)行觀(guān)測。為廠(chǎng)觀(guān)測方便，轉像系統的設計應使系統所成的像為完全一致的像。

  照明系統位于載物臺(物體)之上，而物鏡組則在載物臺之下，其相對位置恰好和一般生物顯微鏡相反，“倒置”二字即內此而得。

  (二)暗視場(chǎng)顯微鏡

  暗視場(chǎng)顯微鏡又叫做暗視野顯微鏡，它與普通明視場(chǎng)顯微鏡的主要區別是照明方式不同。普通顯微鏡是讓光速透過(guò)標本后直接進(jìn)入物鏡，所以視場(chǎng)是明亮的，暗視場(chǎng)顯微鏡卻用強而窄的光束照射標本，而又不讓光束直接進(jìn)人物鏡。但由于標本中的微粒能夠散射光線(xiàn)，這些散射光中，有一部分能夠進(jìn)人物鏡。因此，在黑暗的背景上，能看見(jiàn)標本中微粒的閃爍光點(diǎn)，好僚微粒本身在發(fā)光一樣。這道理正如一間暗室內，從墻上的小孔射人一束強烈的陽(yáng)光，能夠在光路上看見(jiàn)灰塵的存在一樣。這種現象，在光學(xué)上稱(chēng)為丁達爾(Tyndall)現象。暗視場(chǎng)顯微鏡就是根據這一原理設計的。

  普通明視場(chǎng)顯微鏡，在中心照明的情況下，極限只能分辨0.2μm的細節，但暗視場(chǎng)顯微鏡可以分辨0.004μm以上的微粒的存在。也就是說(shuō)，用普通顯微鏡看不見(jiàn)的微粒，利用暗視場(chǎng)顯微鏡可以看見(jiàn)。但由于暗現場(chǎng)顯微鏡是利用被檢物體表面散射的光線(xiàn)來(lái)觀(guān)察物體的，因此只能看到物體的外表輪廓和運動(dòng)狀態(tài)，而不能辨認其內部結構。