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    細胞破碎的技術(shù)方法

    [2013/9/9]

      細胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來(lái)的技術(shù),是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎。結合重組DNA技術(shù)和組織培養技術(shù)上的重大進(jìn)展,以前認為很難獲得的蛋白質(zhì)現在可以大規模生產(chǎn)。

      由于細菌、酵母、真菌、植物都有細胞壁,但成分不同,且同類(lèi)細胞結成的網(wǎng)狀結構不同,因此其細胞壁的堅固程度不同,總體呈現遞增態(tài)勢。動(dòng)物細胞雖沒(méi)有細胞壁,但具有細胞膜,也需要一定的細胞破碎方法來(lái)破膜,達到提取產(chǎn)物的目的。

      化學(xué)試劑法

      • 方法:某些有機溶劑(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學(xué)藥品都可以改變細胞壁或膜的通透性從而使內含物有選擇地滲透出來(lái)。SDS(十二烷基磺酸鈉)是典型的陰離子表面活性劑

      • 特點(diǎn):提取核酸時(shí),常用此法破碎細胞。

      • 存在的問(wèn)題:

      a) 時(shí)間長(cháng),效率低;

      b) 化學(xué)試劑毒性較強,同時(shí)對產(chǎn)物也有毒害作用

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