色譜柱的種類(lèi)與評價(jià)

　　色譜柱的種類(lèi)與評價(jià)

　　一般地說(shuō)，根據樣品的性質(zhì)決定采用何種液相色譜方法，然后再選擇不同類(lèi)型的柱。即不同類(lèi)型的柱則代表了不同的色譜方法。

　　不同種類(lèi)色譜柱的差異在于柱結構、柱填料和柱尺寸的不同。

　　色譜柱有不同的尺寸(長(cháng)度和內徑)，分制備型、常規分析型和微型。不同類(lèi)型柱的硬件也不同，(包括接頭、柱管等方面)，還有徑向加壓柱和夾套加熱柱等。

　　不同液相色譜法的尺寸根據需要可以選取，普通分析3～30cm長(cháng)，內徑4～8mm。常用20cm長(cháng)、4.6mm內徑的柱。制備型柱內徑一般為8mm、25cm長(cháng)。微型柱內徑l～3mm，長(cháng)10～20cm。不同的填料分析的效果可能不同，這是因為生產(chǎn)過(guò)程不同所致。同一廠(chǎng)商生產(chǎn)的同種填料因批號不同也會(huì )有差異，這種差異可能從基質(zhì)就開(kāi)始(表面積、雜質(zhì)、特殊處理)，還有鍵合的化學(xué)物質(zhì)(一氯或三氯硅烷反應劑)，不同廠(chǎng)家生產(chǎn)的填料還會(huì )因專(zhuān)利技術(shù)(預處理、鍵合過(guò)程、填裝技術(shù))等不同而呈現較大差異。由于種種差異、僅能假設同一批號的柱有基本相同的性質(zhì)。

　　多數柱填料基質(zhì)采用多孔硅膠微粒，通常有球形和無(wú)定形兩種，具有不同的粒度、孔徑和表面積。多孔聚合物微粒也適用于反相色譜。聚合物柱的流動(dòng)相范圍廣，流動(dòng)相pH值可在1至13之間。而硅膠基質(zhì)pH僅能在2.5和7之間。顯然，聚合物柱要好一些，但目前仍是以硅膠基質(zhì)的柱為主。原則上，聚合物柱可以克服硅膠基質(zhì)柱的某些不足，但需要大量的實(shí)驗來(lái)證實(shí)，要進(jìn)一步考查聚合物基質(zhì)填料的全面優(yōu)越性。

　　在實(shí)際工作中，選擇性能良好的色譜柱可得到好的結果，首先要注意柱徑、長(cháng)度、填料種類(lèi)和填料粒度。

　　評價(jià)色譜柱的好壞不僅只是N數，還應考慮組分在柱上的保留、鍵合相表面的物性、柱壓降以及峰不對稱(chēng)因子As等。每一根新色譜柱都應標出詳細參數，主要內容包括公司名稱(chēng)、柱名稱(chēng)(商標)、柱填料、尺寸。附一張標準參考色譜圖，并標出色譜條件、樣品名稱(chēng)、流動(dòng)相組成、流速、柱溫、進(jìn)樣體積、檢測器、峰的保留時(shí)間及峰名稱(chēng)等。評價(jià)一根色譜柱的主要指標是：①塔板數N值;②峰不對稱(chēng)因子As;③柱壓降;④鍵合相濃度。