毒膠囊中鉻的測定--分光光度法

　　膠囊通常有硬膠囊和軟膠囊之分。硬膠囊又稱(chēng)空心膠囊;軟膠囊是成膜材料和內容物同時(shí)加工成產(chǎn)品的。

　　硬膠囊根據原材料分，一般包括：明膠膠囊和植物膠囊。明膠膠囊屬于兩節式膠囊。膠囊的尺寸有多種多樣，包括000#、00#、0#--5#=號膠囊。膠囊上還可著(zhù)色印字，呈現出獨特的定制外觀(guān)。

　　近期的毒膠囊事件中主要就是鉻含量超標為主要危害，鉻的檢測方法如下。

　　鉻廣泛存在于自然環(huán)境中，化妝品中鉻的污染來(lái)源主要是原材料及水，但水中鉻主要是電鍍、冶煉、制革，印染、制藥等工業(yè)廢水污染。鉻主要以六價(jià)和三價(jià)兩種價(jià)態(tài)存在。微量的三價(jià)鉻對人體是必需的，過(guò)多時(shí)也和六價(jià)鉻一樣對人體有害。一般六價(jià)的毒性比三價(jià)鉻強100倍，更易被人體吸收�；瘖y品衛生標準規定鉻為禁用物質(zhì)。

　　鉻的測定方法有二苯碳酰二肼比色法及原子吸收分光光度法。含量高時(shí)還可用容量法測定。

　　(一)二苯碳酰二肼分光光度法1 應用范圍本法適用于各類(lèi)化妝品中鉻的測定，最低檢測量為0.2ug。若取1.0g樣品檢測，最低檢出濃度為0.2mg/kg。

　　2 原理化妝品中的三價(jià)鉻用高錳酸鉀氧化為六價(jià)鉻。過(guò)量高錳酸鉀用亞硝酸鈉分解，剩余的亞硝酸鈉被尿素分解。澄清溶液在酸性條件下加二苯碳酰二肼顯色，測定鉻的含量。

　　3試劑3.1鉻標準貯備液準確稱(chēng)取2.828g在105℃～110℃干燥2h的重鉻酸鉀K2Cr2O7(優(yōu)級純)溶于200m1純水中，加1.5m1濃硝酸，用純水定容至1000ml，此溶液1.00ml相當于1.00ug鉻。

　　3.2鉻標準溶液取1.00ml鉻標準貯備液于容量瓶中用純水稀釋至1000ml此溶液1.00ml相當于1.00ug鉻。

　　3.3 1%二苯碳酰二肼溶液[Diphenvlcarbazide，(C6H5NH2)2CO]取二苯碳酰二肼1.0g，加丙酮50ml使溶解。加水使成100ml。

　　3.4 1 1磷酸溶液。

　　3.5 20%尿素溶液。

　　3.6 1 1硫酸溶液。

　　3.7 2%亞硝酸鈉溶液。

　　3.8 6%高錳酸鉀溶液。

　　3.9 硝酸：優(yōu)級純。

　　3.10 硝酸：優(yōu)級純。

　　3.11 辛醇。

　　3.12 過(guò)氯酸：優(yōu)級純。

　　3.13 飽和草酸銨。

　　3.14 1+7硫酸溶液。

　　4 儀器4.1 硬質(zhì)玻璃消解瓶(管)。

　　4.2 50ml比色管。

　　4.3 瓷坩堝。

　　4.4 箱形電爐。

　　4.5 分光光度計。

　　5 分析步驟5.1樣品預處理5.1.1濕式消解法：準確稱(chēng)取1.0～2.0g樣品，置于消解瓶中，同時(shí)做試劑空白。如為干燥固體樣品，可酌加適量的水，使含水約75%以上，加硝酸10～15m1，混合放置，然后徐徐加熱。待激烈反應停止并冷卻后，加硫酸5～7.5m1，再徐徐加熱。如消解過(guò)程中有大量氣泡可加辛醇2～3滴。溶液如變?yōu)榘瞪珪r(shí)，再加2～3ml硝酸繼續加熱，至產(chǎn)生三氧化硫白煙而溶液呈現淡黃色或無(wú)色時(shí)消解完成。若消解不完全可再加少量硝酸及高氯酸1m1，加熱以加速消解，消解液冷卻后加5ml水及5m1草酸銨溶液，加熱至生成三氧化硫白煙為止，冷后加水使成50ml作為待測溶液，同時(shí)做試劑空白。

　　5.1.2 干濕消解法：準確稱(chēng)取樣品1.0g置于瓷坩堝中在小火上緩緩加熱直至碳化。移入箱形電爐中于450～500℃下灰化6h左右，冷卻取出。葳灰化不完全可加硝酸溶液2～5ml反復消解直至樣液為微黃色或無(wú)色，微火濃縮至近干，然后定量轉移至50ml具塞比色管中，用水定容至刻度，必要時(shí)離心沉淀。同時(shí)做試劑空白。

　　5.2 標準曲線(xiàn)5.2.1 吸取鉻標準溶液(3.2)0，0.20，0.50，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00ml，分別置于150ml三角瓶中，加純水至50ml。

　　5.2.2 向標準系列中加0.5ml 1 1硫酸，0.5ml 1 1磷酸及2～3滴6%高錳酸鉀溶液.如紫紅色消褪則應再加高錳酸鉀溶液。各加幾粒玻璃珠，加熱煮沸，如紫紅色消退，需補加高錳酸鉀至煮沸后仍需保持紫紅色。

　　5.2.3 冷卻后向各瓶中加1ml 20%尿素溶液(1)，然后滴加2%亞硝酸鈉溶液，每加1滴需充分振搖，直到紫紅色剛褪去為止。待瓶中不冒氣泡后再將溶液轉移到50ml比色管中，用純水稀釋至刻度。

　　5.2.4 向比色管各加入2.5ml 1 7硫酸，0.5ml 1%二苯碳酰二肼，立即搖勻放置10min(2)在波長(cháng)540nm下用3cm比色皿以純水作參比測定吸光度值。繪制標準曲線(xiàn)。

　　5.3 測定分別取待測溶液及試劑空白溶液50ml于150ml三角瓶中，調pH為7.0，按5.2.2～5.2.4操作。從標準曲線(xiàn)讀取鉻的濃度。

　　6 計算c=(A-A0)V/mV1式中：c――化妝品中鉻的濃度，µg/g;A――從標準曲線(xiàn)上查得樣品管中鉻的含量，µg;A0――試劑空白管中鉻的含量，µg;m――樣品質(zhì)量，g;V――樣品總體積，ml;V1――測定時(shí)所取樣液量，ml。

　　注解(1)還原過(guò)量的高錳酸鉀溶液時(shí)，應先加尿素溶液，然后再加亞硝酸鈉溶液。

　　(2)二苯碳酰二肼與鉻反應時(shí)溫度和放置時(shí)間對顯色都有影響。 15℃時(shí)顏色最穩定，顯色后2～3min顏色可達最深， 15min顯色穩定，1小時(shí)后有明顯褪色。

　　(二)火焰原子吸收分光光度法1 應用范圍本法適用于化妝品中鉻的測定，最低檢出濃度為0.lmg/kg。

　　2 原理樣品經(jīng)消解處理后，使鉻以離子狀態(tài)存在于檢液中，當檢測液中鉻離子被原子化后，基態(tài)原子吸收來(lái)自鉻空心陰極燈發(fā)出的共振線(xiàn)，其吸收量與樣品中鉻含量成正比，根據測量被吸收后的譜線(xiàn)強度與標準系列比較進(jìn)行定量。

　　3 試劑3.1 DDTC溶液：取二乙氨基二硫代甲酸鈉(sodium diethvldithiocarbamate， DDTC，[(C2H5)2NCS2Na·3H2O]2g溶于水使成100ml。

　　3.2 10%過(guò)硫酸銨溶液。

　　3.3 1 1氨水。

　　3.4 乙酸鈉緩沖溶液：取59m1 1mo1/L乙酸和141ml lmo1/L乙酸鈉混合，調節pH=5.0。

　　3.5甲基異丁基銅一MIBK。

　　3.6鉻標準貯備溶液：見(jiàn)二苯碳酰二肼分光光度法(3.1)。

　　3.7鉻標準應用溶液：見(jiàn)二苯碳酰二肼分光光度法(3.2)。

　　4儀器4.1 原子吸收分光光度計及其配件。

　　4.2分液漏斗：125ml分液漏斗。

　　5 分析步驟5.1樣品預處理5.1.1濕式消解法：同二苯碳酰二肼分光光度法(5.1.l)。

　　5.1.2干濕消解法：同二苯碳酰二肼分光光度法(5.1.2)。

　　5.2 測定取5.1.1或5.1.2處理的檢液置于100ml燒杯中，加10%過(guò)硫酸銨5ml后用l+1氨水調節pH為3.0～4.0。加上表面皿，置沸騰水浴中加溫15min。冷卻后移入125m1分液漏斗中。燒杯用純水清洗3次，每次用水15m1，洗液并入分液漏斗中。另取鉻標準應用液(10µg/ml)O.0，0.50，1.00，5.00，10.00，20.00ml，于分液漏斗中加純水60ml，分別向標準及樣品液中加5ml乙酸鈉緩沖液，振搖，加DDTC溶液5ml、MIBK 10ml搖振3min，于暗處靜置分層棄去水層，取MIBK溶液于10ml具塞比色管中，如呈混濁以2000r/min之速度離心分離2～3min使澄清后進(jìn)行測定，以下按原子吸收分光光度法操作。波長(cháng)在357.9nm處測定吸光度。繪制濃度。吸光度標準曲線(xiàn)，計算樣品含量。

　　6 計算C=(A-B)/m式中：c-一化妝品中鉻的濃度，?g/g;A――從標準曲線(xiàn)上查得樣品中鉻的含量， ?g;B――從標準曲線(xiàn)上查得試劑空白鉻的含量， ?g;M――樣品質(zhì)量，g。