生物實(shí)驗中試劑的作用及實(shí)驗方法總結

　　一、化學(xué)物質(zhì)的檢測方法

　�、俚矸邸�—碘液 (藍色)

　�、谶�原性糖——斐林試劑\班氏試劑(磚紅色)

　�、跜O2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水變渾濁)

　�、苋樗帷�—pH試紙

　�、軴2——余燼復然

　�、薜鞍踪|(zhì)——被蛋白酶水解 、雙縮脲試劑(紫紅色)

　�、咧�肪——蘇丹Ⅲ染液 (橘黃色)、蘇丹Ⅳ染液 (紅色)

　�、郉NA——二苯胺(藍色)

　�、崛旧�體——龍膽紫溶液，醋酸洋紅溶液

　　二、實(shí)驗條件的控制方法

　　1、加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物

　　2、減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開(kāi)水

　　3、除去容器中CO2——NaOH溶液

　　4、除去葉中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境

　　5、除去葉中葉綠素——酒精水浴加熱

　　6、除去光合對呼吸干擾——給植株遮光

　　7、如何得到單色光——棱鏡色散或透明薄膜濾光

　　8、血液抗疑——加入檸檬酸鈉

　　9、線(xiàn)粒體提取——細胞勻漿離心

　　10、骨無(wú)機鹽的除去——鹽酸溶液

　　11、滅菌方法——培養基用高壓蒸汽滅菌;接種環(huán)用火焰灼燒滅菌;雙手用肥皂冼凈，擦干后用75%酒精消毒;實(shí)驗室或接種箱用甲醛蒸汽或紫外燈滅菌;整個(gè)過(guò)程都在實(shí)驗室無(wú)菌區或酒精燈旁進(jìn)行。

　　三、實(shí)驗結果的顯示方法

　�、俟夂纤俣取�—O2釋放量或CO2吸收量或有機物生成量

　　◆水生植物可依氣泡的產(chǎn)生量或產(chǎn)生速率;

　　◆離體葉片若事先沉入水底可依單位時(shí)間內上浮的葉片數目;

　　◆植物體上的葉片可依指示劑(如碘液)處理后葉片顏色深淺。

　�、诤粑�速度——O2吸收量或CO2釋放量或有機物消耗量

　�、墼�子或分子轉移途徑——放射性同位素示蹤

　�、芗毎�液濃度大小——質(zhì)壁分離

　�、葜参锛毎�是否死亡——質(zhì)壁分離

　�、藜谞钕偌に亍獎�(dòng)物耗氧量，發(fā)育速度等

　�、呱�長(cháng)激素—生長(cháng)速度(體重、體長(cháng)變化)

　�、嘁葝u素作用—動(dòng)物活動(dòng)狀態(tài)

　�、峋�量—菌落數，亞甲基藍褪色程度

　　四、實(shí)驗中控制溫度的方法

　　1、還原糖，DNA鑒定——沸水浴加熱

　　2、酶促反應——水浴保溫

　　3、用酒精溶解葉中的葉綠素——酒精要隔水加熱、

　　4、細胞和組織培養以及微生物培養——恒溫箱培養

　　五、實(shí)驗中常用器材和藥品的使用

　　1、NaOH：用于吸收CO2或改變溶液的pH

　　2、Ca(OH)2：鑒定CO2

　　3、CaCl2提高細菌細胞壁的通透性

　　4、HCl：解離或改變溶液的pH

　　5、NaHCO3：提供CO2

　　6、NaCl：配制生理鹽水或用于提取DNA

　　7、瓊脂：激素或其他物質(zhì)的載體或培養基的凝固劑

　　8、亞甲基藍：用于檢測污水的細菌含量

　　9、酒精：用于消毒、提純DNA、葉片脫色及配制解離液

　　10、蔗糖：測定植物細胞液濃度或觀(guān)察質(zhì)壁分離和復原、作為碳源和能源物質(zhì)

　　11、濾紙：過(guò)濾或紙層析

　　12、紗布、尼龍布：過(guò)濾，遮光

　　13、龍膽紫溶液或醋酸洋紅：堿性染料，用于染色體染色

　　14、檸檬酸鈉——血液抗凝劑

　　六、一些常見(jiàn)的實(shí)驗方法

　�、�、根據顏色來(lái)確定某種物質(zhì)的存在：

　　淀粉 I2(藍色);還原性糖 斐林試劑(磚紅色);脂肪 蘇丹Ⅲ(橘黃)或 蘇丹Ⅳ(紅色);蛋白質(zhì) 雙縮脲試劑(紫色);

　　大腸桿菌 伊紅和美藍(菌落為深紫色，有金屬光澤)

　�、�、用顏色標記法來(lái)確定原腸胚三個(gè)胚層的分化情況。

　�、�、用熒光標記法來(lái)證明細胞膜具有一定的流動(dòng)性

　�、�、同位素示蹤法：光合作用產(chǎn)生氧氣的來(lái)源; 光合作用中二氧化碳的去向; 噬菌體侵染細菌實(shí)驗證明DNA是遺傳物質(zhì)，蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì); DNA的復制是半保留復制。

　�、�、確定某種元素為植物生長(cháng)必需的元素的方法: 水培法(完全培養液與缺素完全培養液對照)

　�、�、獲得無(wú)籽果實(shí)的方法: 用適宜濃度的生長(cháng)素處理花蕾期已去雄的子房，如無(wú)籽蕃茄、 誘導染色體變異，如無(wú)籽西瓜。

　�、�、確定某種激素功能的方法： 飼喂法，切除注射法，閹割移植法，切除口服法。

　�、�、確定傳入、傳出神經(jīng)的功能： 刺激 觀(guān)察效應器的反應或測定神經(jīng)上的電位變化。

　�、�、植物雜交的方法 雌雄同花：花蕾期去雄 套袋 開(kāi)花期人工授粉 套袋 雌雄異花：花蕾期雌花套袋 開(kāi)花期人工授粉 套袋

　�、�、確定某一顯性個(gè)體基因型的方法： 測交; 該顯性個(gè)體自交。

　�、�、確定某一性狀為顯性性狀或隱性性狀的方法： 具有一對相對性狀的純合體的雜交 自交，觀(guān)察后代是否有性狀分離。

　�、�、確定某一個(gè)體是否具有抗性基因的方法： 確定小麥是否具有抗銹病基因，用銹病菌去侵染，一段時(shí)間后，觀(guān)察有無(wú)銹斑出現。

　�、�、鑒定血型的方法： 用標準血清與待測血型混合，在顯微鏡下觀(guān)察血液的凝集情況。

　�、�、育種的方法： 雜交育種;人工誘變育種;單倍體育種;基因工程育種;細胞工程育種;多倍體育種等。

　�、�、測定種群密度的方法：樣方法; 標志重捕法

　�、�、生態(tài)瓶的制作方法;瓶必須透明，且封閉

　�、�、分離微生物的方法： 平板劃線(xiàn)法;用選擇培養基培養(如：圓褐固氮菌的分離，金黃色葡萄球菌的分離，細菌和酵母菌的分離)

　�、�、測定微生物群體生長(cháng)的方法：

　　測定細菌的數目---顯微計數

　　測定細菌的重量---取一定體積的培養基，經(jīng)離心分離，反復洗滌后，稱(chēng)濕重，或烘干后稱(chēng)干重。

　　七、實(shí)驗研究方法

　　1、顯微觀(guān)察法 如觀(guān)察植物細胞有絲分裂的實(shí)驗，觀(guān)察植物細胞質(zhì)壁分離和復原的實(shí)驗。

　　2、觀(guān)察法 觀(guān)察微生物的外在性狀和表現等，如觀(guān)察注射了甲狀腺激素的小狗的活動(dòng)狀況，觀(guān)察動(dòng)物的毛色和植物花色的遺傳實(shí)驗等。

　　3、同位素示蹤法 如噬菌體侵染細菌的實(shí)驗，用18O和14C追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉移途徑的實(shí)驗等。

　　4、加法創(chuàng )意 如用飼喂法研究甲狀腺激素的實(shí)驗、用注射法研究生長(cháng)激素的實(shí)驗，用移植法研究性激素的實(shí)驗等。

　　5、減法創(chuàng )意 如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素、生長(cháng)激素的實(shí)驗，雌蕊授粉后除去發(fā)育著(zhù)的種子實(shí)驗等。

　　6、雜交實(shí)驗法 如孟德?tīng)柊l(fā)現遺傳定律的植物雜交、測交的實(shí)驗，小麥的雜交實(shí)驗等。

　　7、化學(xué)分析法 如番茄和水稻對Ca 和Si選擇吸收的實(shí)驗，葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗等。

　　8、理論分析法 如大小草履蟲(chóng)競爭的實(shí)驗，植物根向地生長(cháng)、莖背地生長(cháng)的實(shí)驗，植物向光性的實(shí)驗等。

　　9、模擬實(shí)驗法 如滲透作用的實(shí)驗裝置，分離定律的模擬實(shí)驗等。

　　八、實(shí)驗技術(shù)

　　1、光學(xué)顯微鏡的使用

　　適用于觀(guān)察生物的微觀(guān)結構，如細胞的結構，包括光鏡下可看到的各種細胞器。

　　2、臨時(shí)裝片、切片和涂片的制作技術(shù)

　　適用于顯微觀(guān)察，凡需在顯微鏡下觀(guān)察的生物材料，必須先制成臨時(shí)裝片、切片或涂片。如“觀(guān)察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原的實(shí)驗”中要制作洋蔥表皮的臨時(shí)裝片，在生物組織中脂肪的鑒定中要制作花生種子的切片等。

　　3、研磨和過(guò)濾技術(shù)

　　適用于從生物組織中提取物質(zhì)，如酶、色素等。研磨時(shí)要先將生物材料切碎，然后加入研磨劑〈常用SiO2〉、提取液及其他必要物質(zhì)，充分研磨后，往往要進(jìn)行過(guò)濾，以除去濾渣，所用過(guò)濾器具則根據需要或或根據試題中提供的器材加以選用，如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等。

　　4、解離技術(shù)

　　用于破壞細胞壁，分散植物細胞，制作臨時(shí)裝片。

　　5、恒溫技術(shù)

　　適用于有酶參加的生化反應，一般用水浴或恒溫箱。根據題目要求選用。

　　6、紙層析技術(shù)

　　適用于溶液中物質(zhì)分離。重要步驟包括制備濾紙條、畫(huà)濾液細線(xiàn)、層析分離。

　　7、根尖培養技術(shù) 觀(guān)察植物根尖有絲分裂的實(shí)驗

　　8、溶液培養法 探究植物必需的礦質(zhì)元素的實(shí)驗，〈拓展——微生物生長(cháng)因子的判斷的實(shí)驗〉;植物的無(wú)土栽培〈注意溶液濃度和溶解氧〉。