熒光分析方法

　　熒光學(xué)分析法是利用待測定組分所顯示出的吸收光譜或發(fā)射光譜，既包括原子光譜也包括分子光譜。利用被測定組分中的分子所產(chǎn)生的吸收光譜的分析方法，即通常所說(shuō)的可見(jiàn)與紫外分光光度法、紅外光譜法;利用其發(fā)射光譜的分析方法，常見(jiàn)的有熒光光度法。利用被測定組分中的原子吸收光譜的分析方法，即原子吸收法;利用被測定組分的發(fā)射光譜的分析方法，包括發(fā)射光譜分析法、原子熒光法、X射線(xiàn)原子熒光法、質(zhì)子熒光法等。

　　熒光分析法

　　當紫外光照射到某些物質(zhì)的時(shí)候，這些物質(zhì)會(huì )發(fā)射出各種顏色和不同強度的可見(jiàn)光，而當紫外光停止照射時(shí)，這種光線(xiàn)也隨之很快地消失，這種光線(xiàn)稱(chēng)為熒光。

　　第一次記錄熒光現象的是16世紀西班牙的內科醫生和植物學(xué)家N.Monardes，1575年他提到在含有一種稱(chēng)為“LignumNephriticum”的木頭切片的水溶液中，呈現了極為可愛(ài)的天藍色，在17世紀，Boyle(1626—1691)和Newton(1624—1727)等著(zhù)名科學(xué)家再次觀(guān)察到熒光現象，倒置顯微鏡倒置顯微鏡倒置顯微鏡倒置顯微鏡。并且給予更詳細的描述。盡管在17世紀和18世紀中還發(fā)現了其它一些發(fā)熒光的材料和溶液，然而在解釋熒光現象方面卻幾乎沒(méi)有什么進(jìn)展。

　　直到1852年Stokes在考察奎寧和葉綠素的熒光時(shí)，用分光計觀(guān)察到其熒光的波長(cháng)比入射光的波長(cháng)稍為長(cháng)些，才判明這種現象是這些物質(zhì)在吸收光能后重新發(fā)射不同波長(cháng)的光，而不是由光的漫射作用所引起的，從而導入了熒光是光發(fā)射的概念，他還由發(fā)熒光的礦物“螢石”推演而提出“熒光”這一術(shù)語(yǔ)。Stokes還對熒光強度與濃度之間的關(guān)系進(jìn)行了研究，描述了在高濃度時(shí)以及外來(lái)物質(zhì)存在時(shí)的熒光猝滅現象。此外，他似乎還是第一個(gè)(1864年)提出應用熒光作為分析手段的人。

　　1867年，Goppelsr—ouml;der)進(jìn)行了歷史上首次的熒光分析工作，應用鋁—桑色素配合物的熒光進(jìn)行鋁的測定。1880年，Liebeman提出了最早的關(guān)于熒光與化學(xué)結構關(guān)系的經(jīng)驗法則，到19世紀末，人們已經(jīng)知道了包括熒光素、曙紅、多環(huán)芳烴等600種以上的熒光化合物。

　　20世紀以來(lái)，熒光現象被研究得更多了。例如，1905年Wood發(fā)現了共振熒光;1914年Frank和Hertz利用電子沖擊發(fā)光進(jìn)行定量研究;1922年Frank和Cario發(fā)現了增感熒光;1924年Wawillous進(jìn)行了熒光產(chǎn)率的絕對測定;1926年Gaviola進(jìn)行了熒光壽命的直接測定等等。

　　熒光分析方法的發(fā)展，與儀器應用的發(fā)展是分不開(kāi)的。19世紀以前，熒光的觀(guān)察是靠肉眼進(jìn)行的，直到1928年，才由Jette和West提出了第一臺光電熒光計。早期的光熒光顯微鏡熒光顯微鏡熒光顯微鏡電熒光計的靈敏度是有限的，1939年Zworykin和Rajchman發(fā)明光電倍增管以后，在增加靈敏度和容許使用分辨率更高的單色器等方面，是一個(gè)非常重要的階段。1943年Dutton和Bailey提出了一種熒光光譜的手工校正步驟，1948年由Studer推出了第一臺自動(dòng)光譜校正裝置，到1952年才出現商品化的校正光譜儀器。

　　近十幾年來(lái)，在其它學(xué)科迅速發(fā)展的影響下，隨著(zhù)激光、微處理機和電子學(xué)的新成就等一些新的科學(xué)技術(shù)的引入，大大推動(dòng)了熒光分析法在理論方面的進(jìn)展，促進(jìn)了諸如同步熒光測定、導數熒光測定、時(shí)間分辨熒光測定、相分辨熒光測定、熒光偏振測定、熒光免疫測定、低溫熒光測定、熒光顯微鏡熒光顯微鏡熒光顯微鏡固體表面熒光測定、熒光反應速率法、三維熒光光譜技術(shù)和熒光光纖化學(xué)傳感器等熒光分析方面的某些新方法、新技術(shù)的發(fā)展，并且相應地加速了各式各樣新型的熒光分析儀器的問(wèn)世，使熒光分析法不斷朝著(zhù)高效、痕量、微觀(guān)和自動(dòng)化的方向發(fā)展，方法的靈敏度、準確度和選擇性日益提高，方法的應用范圍大大擴展，遍及于工業(yè)、農業(yè)、醫藥衛生、環(huán)境保護、公安情報和科學(xué)研究等各個(gè)領(lǐng)域中。

　　如今，熒光分析法已經(jīng)發(fā)展成為一種重要且有效的光譜化學(xué)分析手段。在我國，50年代初期僅有極少數的分析化學(xué)工作者從事熒光分析方面的研究工作，但到了70年代后期，熒光分析法已引起國內分析界的廣泛重視，在全國眾多的分析化學(xué)工作者中，已逐步形成一支從事這一領(lǐng)域工作的隊伍偏光顯微鏡偏光顯微鏡近年來(lái)，國內發(fā)表的有關(guān)熒光分析方面的論文數量增長(cháng)較快，所涉及的內容也已從經(jīng)典的熒光分析法逐步擴展到新近發(fā)展起來(lái)的一些新方法和新技術(shù)，在儀器應用方面也陸續有幾種類(lèi)型的國產(chǎn)的熒光分析光度計問(wèn)世，為這一分析方法的發(fā)展和普及提供了一定的物質(zhì)條件。