紫外可見(jiàn)分光光度計在生命科學(xué)中的應用

　　目前,紫外可見(jiàn)分光光度計的應用主要是在定量分析方面。先從生命科學(xué)領(lǐng)域的應用來(lái)介紹。紫外可見(jiàn)分光光度計在生命科學(xué)中應用非常廣泛。最主要的是以下5個(gè)方面。

　　1.蛋白質(zhì)分析工作中的應用

　　紫外可見(jiàn)分光光度計在蛋白質(zhì)的分析中,最主要的是作蛋白質(zhì)含量檢測;一般是在蛋白質(zhì)的吸收峰上作吸光度測定。因為蛋白質(zhì)對紫外光的主要吸收波長(cháng)為280nm,所以,采用光度測量模式,將儀器的波長(cháng)GOTO到蛋白質(zhì)的最大吸收峰波長(cháng)280nm上,測試其吸光度大小,就可完成對蛋白質(zhì)的定量檢測。

　　2.核酸分析工作中的應用

　　紫外可見(jiàn)分光光度計在核酸分析中的應用,主要是用來(lái)對核酸的定量檢測;因為核酸的吸收峰在260nm。我們只要采用光度測量模式,將紫外可見(jiàn)分光光度計的波長(cháng)GOTO到核酸的最大吸收峰260nm上,測試其吸光度大小就是了。

　　3.氨基酸分析工作中的應用

　　紫外可見(jiàn)分光光度計在氨基酸分析中的應用,主要是用來(lái)對氨基酸的定量檢測。因為氨基酸對紫外光的主要吸收波長(cháng)為230nm,所以,我們只要采用光度測量模式,將紫外可見(jiàn)分光光度計儀器的波長(cháng)GOTO到氨基酸的最大吸收峰230nm上,就可測試其吸光度大小,從而計算出氨基酸的含量。但是,因為氨基酸分析時(shí),一般是將它溶解在水中,而水在230nm附近有很多干擾吸收線(xiàn),所以,在用紫外可見(jiàn)分光光度計對氨基酸分析檢測時(shí),要注意防止干擾的問(wèn)題。此外,還需注意:只有少數氨基酸有紫外吸收,多數氨基酸無(wú)紫外吸收或很弱,測定時(shí)要衍生化后再測。

　　4.糖類(lèi)分析測試工作中的應用

　　紫外可見(jiàn)分光光度計在糖的分析中,主要是作定量檢測。因為糖對紫外光的主要吸收波長(cháng)為218nm,所以,對糖類(lèi)進(jìn)行分析時(shí),只要采用光度測量模式,將紫外可見(jiàn)分光光度計儀器的波長(cháng)GOTO到氨基酸的最大吸收峰218nm上,就可測試其吸光度大小,從而計算出糖的含量。

　　5.多糖分析測試工作中的應用

　　紫外可見(jiàn)分光光度計在多糖的分析中,主要也是作定量檢測。因為多糖對紫外光的主要吸收波長(cháng)為206nm,所以,我們只要采用光度測量模式,將紫外可見(jiàn)分光光度計儀器的波長(cháng)GOTO到多糖的最大吸收峰206nm上,就可測試其吸光度大小,從而計算出多糖的含量。

　　但是多糖的分析難度很大。因為,在206nm處的時(shí)候,光源(氘燈)的能量已經(jīng)很弱,儀器光學(xué)系統的能量輸出也很低,光電倍增管的靈敏度也很低,206nm左右的干擾也很大。所以,用紫外可見(jiàn)分光光度計作多糖的分析是很難的事,目前許多科學(xué)家正在研究中。