如何用半自動(dòng)定氮儀測定蛋白質(zhì)含量

　　凱氏定氮法是測定食品中蛋白質(zhì)含量的經(jīng)典方法,測定結果穩定,準確。其中半自動(dòng)定氮儀、蛋白質(zhì)測定儀都是利用凱氏定氮儀設計的，但是全自動(dòng)蛋白質(zhì)測定儀價(jià)格昂貴,目前尚難普及。而相應的半自動(dòng)定氮儀，卻得到了相關(guān)人士的認可。因為相較于全自動(dòng)蛋白質(zhì)測定儀，它的性?xún)r(jià)比更高，而且其測定結果與標準法測定無(wú)顯著(zhù)差異。定氮儀作為蛋白質(zhì)含量測定的首推儀器，具有不可撼動(dòng)的地位。

　　用半自動(dòng)定氮儀測定蛋白質(zhì)含量，其步驟如下：

　　1.樣品消解：準確稱(chēng)取0·5~2·0g混勻固體樣品或吸取5·0~10·0ml液體樣品于干凈的消化管內,加0·5~1·0g硒粉或10g硫酸鉀 1g硫酸銅,10ml硫酸,搖勻,加10ml過(guò)氧化氫,混勻,將消化管放入消化器,放上裝好密封圈的排污管,打開(kāi)抽氣三通進(jìn)水,使抽氣三通處于吸汽狀態(tài)。接通電源,進(jìn)行消化,如遇難消化的奶粉等樣品,可于消化過(guò)程中適當增加過(guò)氧化氫的加入量,至消化液呈透明藍綠色液體,關(guān)閉電源,冷卻,定容至100ml。此過(guò)程約需1~2h。

　　2.測定：打開(kāi)電源,按儀器說(shuō)明書(shū)調試儀器進(jìn)入待機狀態(tài)(約0·5min)。把裝有50ml硼酸溶液及2~3滴指示液的三角瓶放到接收托盤(pán)上,接收管插入液面,再將內裝適量消化樣品的消化管放到蒸餾器上,加20ml純水及消化時(shí)硫酸5倍量的氫氧化鈉液,打開(kāi)蒸汽開(kāi)關(guān)進(jìn)行蒸餾。當流出液至150ml左右時(shí)下移接收瓶,使接收管脫離液面,用純水沖洗接收管,繼續蒸餾0·5min,結束。取下消化管,關(guān)掉蒸汽開(kāi)關(guān),儀器還原到待機狀態(tài)。餾出液用0·0500mol/L的鹽酸標準溶液滴定至淡紫色為終點(diǎn),計算蛋白質(zhì)含量。同時(shí)做試劑空白實(shí)驗。

　　與粗蛋白測定儀相比，半自動(dòng)定氮儀只是較后者少了消化爐，而其測定結果能夠滿(mǎn)足實(shí)驗室的需求。因此，半自動(dòng)定氮儀在很多地方都得到了認可。