移液器的檢測和校準指南

　　一、實(shí)驗室簡(jiǎn)單檢測

　　(一) 氣密性檢測

　　移液器吸滿(mǎn)液體后，手持垂直放置15s，檢查吸嘴的尖頭有無(wú)液滴，如有，則說(shuō)明漏氣。

　　(二) 準確性檢測

　　1) 量程小于1μl，建議使用分光光度法檢測。將移液器調至目標體積，然后移取染料溶液，加入一定體積的蒸餾水中，測定溶液的稀釋度(334nm或340nm)，重復幾次移液操作，計算移液器的精確度。

　　2) 量程大于1μl，可以用稱(chēng)重法檢測。通過(guò)對水的稱(chēng)重，轉換成體積(體積=質(zhì)量/密度)，鑒別移液器的準確性。由于水的密度是隨著(zhù)溫度變化而變化，且稱(chēng)量天平本身精確度不符合檢測要求，檢測又大多在一個(gè)開(kāi)放式空間內操作，偏差在所難免。因而，此種稱(chēng)量法只能現場(chǎng)粗略地判斷移液器的準確性，進(jìn)一步的校準必須在專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗室操作進(jìn)行。

　　注意：稱(chēng)重法實(shí)驗室必備條件是高度靈敏的分析天平(定期校準)、雙蒸水和稱(chēng)量容器。水、移液器和吸嘴必須具有相同的溫度(20℃時(shí)水的密度為0.09982)。

　　二、專(zhuān)業(yè)校準

　　移液器的工作量大，長(cháng)期使用，將會(huì )使彈簧彈力發(fā)生變形，加之本身是塑料，不耐磨擦，就會(huì )產(chǎn)生誤差。為了保證移液器傳遞液體量的準確性，必須對移液器進(jìn)行定期校準。為了更好地發(fā)揮該類(lèi)計量?jì)x器的作用，對新購進(jìn)的儀器要進(jìn)行校準才能使用;對正在使用的計量?jì)x器，由于長(cháng)期使用會(huì )造成其示值于度量對象的誤差，這種誤差若不進(jìn)行控制，及時(shí)校正，必定會(huì )影響科研工作。因此，對使用的移液器要定期檢定、校正，并建立檔案，只有這樣才能使其在日常工作中更好的發(fā)揮作用。

　　目前，在許多實(shí)驗室條件下進(jìn)行的常規檢測并不能完全取代專(zhuān)業(yè)的校準工作，因為校準對于外部環(huán)境、工作條件及使用的精密儀器具有較高的技術(shù)要求，而這些條件往往是大多數實(shí)驗室無(wú)法提供的�，F在一些大型的移液器制造商均采用全球統一的移液器標準操作規范，利用專(zhuān)業(yè)軟件校正系統，通過(guò)計算機對分析天平進(jìn)行在線(xiàn)控制，測量、數據采集、計算、結果評價(jià)等環(huán)節由軟件控制完成，所有人為操作都被計算機記錄隨報告打印出來(lái)，采用電腦對數據進(jìn)行評估認證，完全排除了人為操縱校準結果的可能性，并制定當地代理商提供專(zhuān)業(yè)的校準和維修服務(wù)。下面以Eppendorf公司為例，介紹其專(zhuān)業(yè)校準操作。

　　(一) 校準的基本操作條件

　　操作室：獨立房間，顯示溫度和濕度狀態(tài)。

　　溫度控制：15~30℃(±0.5℃)

　　濕度控制：60%~90%

　　工作臺面：防震、防塵、遠離熱源、無(wú)陽(yáng)光直射。

　　天平：0.000 01g精密分析天平(小數點(diǎn)后5位)，每年需由廠(chǎng)家進(jìn)行校準。

　　防蒸發(fā)裝置：Eppendorf提供的濕度阱，防止稱(chēng)量液體的揮發(fā)。

　　測試介質(zhì)：雙蒸水，每4h更換一次，批次更換周期不大于2周。

　　(二) 操作過(guò)程

　　1) 同溫化處理：校正前，所有移液器及校正介質(zhì)(如工作臺、天平、雙蒸水等)置于相同操作間至少4h，以確保它們具有相同的溫度。

　　2) 內外部清洗。

　　3) 潤滑活塞。

　　4) 校準：采用三點(diǎn)校準法，即根據移液器量程范圍，選取最低量程、中間值和最高量程三點(diǎn)分別測試10次，各個(gè)測試點(diǎn)取其平均值，計算其準確度(inaccuracy)和精確度(imprecision)，評價(jià)標準符合DIN 12650要求。

　　5) 校準報告：可根據客戶(hù)需求提供給算計打印的標準報告或PICASO校正報告，符合ISO、DIN或ASTM相關(guān)標準。

　　三、影響準確性的因素

　　1) 操作錯誤：包括30℃手持式移液器吸液;與吸嘴不匹配，較易造成脫落;殘留的試劑倒流，污染活塞和密封圈;快速吸液排液，導致部分液體殘留在吸頭上等都會(huì )影響準確性。

　　2) 移液器損壞：包括移液器的頭部被刮擦，斷裂受損;活塞受污染;彈簧受腐蝕等。

　　3) 操作條件的影響：包括未作調整吸取與水不同密度的液體;樣品和移液器的差別太大等。

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