細胞培養常見(jiàn)問(wèn)題分析

細胞常見(jiàn)問(wèn)題分析

1、冷凍管應如何解凍？

取出冷凍管后，須立即放放37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可以超過(guò)冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另外凍管由液氨桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。

2、可否使用與原先培養條件不同之培養基？

不能。每一細胞株均有其特定使用自己適應之細胞培養基，若驟然使用和原先提供之培養條件不同的之培養基，細胞大都無(wú)法立即適應，造成細胞無(wú)法存活。

3、可否使用與原先培養條件不同之血清種類(lèi)？

不能。血清是細胞培養上一個(gè)極為重要的營(yíng)養來(lái)源，所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對于細胞的生長(cháng)會(huì )產(chǎn)品極大的影響。來(lái)自不同特種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會(huì )造成細胞無(wú)法存活。

4、懸浮性細胞應如何繼代處理？

一般僅需持續加入新鮮培養基于原培養角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養液太多時(shí)，可將培養角瓶口端稍微抬高，直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細胞之培養液至另一新的培養角瓶，加入新鮮培養基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。

5、欲將一般動(dòng)物細胞離心下來(lái)，其離心速率應為多少轉速？

欲回收動(dòng)物細胞，其離心速率一般為300xg（約1，000rpm），5-10分鐘，過(guò)高之轉速，將造成細胞死亡。

6、如果細胞發(fā)生微生污染時(shí)，應如何處理？

加入相應抗生素。直接滅菌后丟棄。

7、各種細胞培養用的dish，flash是否均相同？

不同廠(chǎng)牌的dish或flash，其所coating的polymer不同，制造程序亦不同，雖對大部分細胞沒(méi)有太大之影響，惟少數則可能因使用廠(chǎng)牌不同之dish或flask而有顯著(zhù)之生長(cháng)差異。