紫外可見(jiàn)分光光度計系統的使用方法

　　儀器名稱(chēng)：紫外/可見(jiàn)分光光度計系統

　　儀器型號：Lambda 25

　　生產(chǎn)廠(chǎng)家：perkinElmer

　　使用方法：

　　開(kāi)機步驟

　　1 開(kāi)光譜儀電源

　　2 開(kāi)計算機電源

　　3 在文件管理器中用鼠標指按UV WinLab圖標，此時(shí)出現UV WinLab的應用窗口，儀器已準備好，可選用適當方法進(jìn)行分析操作。

　　2方法：

　　在分析中必須對分光光度計設定一些必要的參數，這些參數的組合就形成一個(gè)“方法”。Lambda系列UV WinLab軟件預設四類(lèi)常用方法。

　　1)掃描(SCAN),用以進(jìn)行光譜掃描。

　　2)時(shí)間驅動(dòng)(TIME DRIVER),用以觀(guān)察一定時(shí)間內某種特定波長(cháng)處縱坐標值的變化，如酶動(dòng)力學(xué)。

　　3)波長(cháng)編程(WP)用以在多個(gè)波長(cháng)下測定樣品在一定時(shí)間內的縱坐標值變化，并可以計算這些縱坐標值的差或比值。

　　4)濃度(CONC)用以建立標準曲線(xiàn)并測定濃度。

　　2.1 進(jìn)入所需方法，在方法窗口中選擇所需方法的文件名。

　　2.2 方法的設定

　　2.2.1 掃描、波長(cháng)編程及時(shí)間驅動(dòng)

　　各項方法可根據顯示的參數表，逐項按需要選用或填入，并可參考提示。

　　2.2.2 濃度

　　濃度方法窗口下方標簽較多，說(shuō)明做濃度測定時(shí)需要參數較多。用鼠標指按每一標簽，可翻出下頁(yè)，其上有一些需要測定的參數。必須逐頁(yè)設定。

　　3 工具條

　　3.1 SETUP

　　當所需的各項參數都已在參數中設好后，必須用鼠標指按SETUP，才能將儀器調整到所設狀態(tài)。

　　3.2 AUTOZERO

　　用鼠標指按此鍵，分光光度計即進(jìn)行調零(在光譜掃描中則進(jìn)行基線(xiàn)校正)。

　　3.3 START

　　用鼠標指按此鍵，光度計即開(kāi)始運行所設定的方法。

　　4 方法運行

　　4.1 掃描，時(shí)間驅動(dòng)，波長(cháng)編程

　　方法選好后，先放入參比溶液，按AUTOZERO鍵，進(jìn)行自自動(dòng)校零或背景校正結束后再放入樣品，按START，分光光度計即開(kāi)始進(jìn)行，同時(shí)屏幕上出現圖形窗口，將結果顯示出來(lái)。

　　4.2 濃度

　　4.2.1制訂標準曲線(xiàn)

　　1 方法選好后，確認各項數據正確，特別是REFS頁(yè)中第一行要選中右上角的“edit mode”。再放入參比溶液，按AUTOZERO鍵自動(dòng)校零或背景校正。

　　2 按setup,待該圖標消失后，再按“start”,按提示依次放入標準色列的各管溶液，每次都按提示進(jìn)行操作。

　　3 標準色列測定 完畢后，屏幕上出現calibgraphwindow,顯示擬合的標準線(xiàn)，并標出各項標準管的位置，屏幕下方還有一條Concentration mode的對話(huà)框，可以用來(lái)修改擬合的曲線(xiàn)類(lèi)型(按 change calbration),或修改標準溶液的任何一管(replace),或取消某一管(delete),或增加標準溶液管數(add)。如過(guò)已經(jīng)滿(mǎn)意，則按analyse sample鍵，進(jìn)入樣品測定窗口。

　　4 標準曲線(xiàn)有關(guān)的各項數據，均在calibresultwindow中，可用鼠標將其調出觀(guān)察。其中包括每個(gè)標準溶液的具體數據，標準曲線(xiàn)的回程方程式，相關(guān)系數，殘差。

　　4.2.2樣品濃度測定

　　4.2.2.1剛制定好的標準曲線(xiàn)接著(zhù)進(jìn)行樣品濃度測定時(shí)

　　1 只需在concentration mode對話(huà)框按analyse sample鍵，進(jìn)入樣品測定窗口。

　　2 按設定的樣品順序放入各樣品管，每次按提示進(jìn)行操作。

　　3 屏幕上出現結果窗口，結果數據將依次顯示在樣品表中的相應位置。

　　4.2.2.2利用原有的標準曲線(xiàn)接著(zhù)進(jìn)行樣品濃度測定時(shí)

　　4.2.2.2.1 調出所測定樣品的濃度方法文件，首先調出refs頁(yè)，將原設edit mode選項取消，改設左上角的using exiting calibration。重新將方法存盤(pán)，則今后再調用時(shí)即不需再作修改。

　　4.2.2.2.2 在sample頁(yè)中按要求重設各種樣品名稱(chēng)機樣品信息。

　　4.2.2.2.3 按工具條中setup鍵，將主機設到該方法所設定的條件。

　　4.2.2.2.4 將參比溶液放入比色室，按autozero鍵做背景校零。

　　4.2.2.2.5 按start鍵，按設定的樣品順序放入各樣品管，每次按提示進(jìn)行操作。

　　4.2.2.2.6 屏幕上出現結果窗口，結果數據將依次顯示在樣品表中相應位置。

　　5關(guān)機

　　5.1 將方法及數據存盤(pán)

　　5.2 關(guān)閉方法窗

　　5.3 退出UV WinLab

　　5.4 取出樣品及參比溶液

　　5.5 清潔光譜儀，特別是樣品室

　　5.6 關(guān)閉光譜電源

　　5.7 關(guān)閉計算機電源。