PCR儀的分類(lèi)和選購

　　【PCR儀的種類(lèi)】

　　分類(lèi)總是五花八門(mén)，總體來(lái)說(shuō)可以分為PCR擴增儀和實(shí)時(shí)熒光PCR儀兩大類(lèi)，有人也把它們稱(chēng)為半自動(dòng)和全自動(dòng)，或者定性和定量，都是比較不準確的稱(chēng)呼。

　　PCR最重要的就是個(gè)升降溫過(guò)程，最初的水浴鍋式PCR，就是三個(gè)水浴箱，一個(gè)機械臂，定時(shí)抓出反應槽轉換水浴鍋。這種東東體積大，迅速慢，但其實(shí)結果并不比以后的PCR儀差，我現在都很欣賞。后來(lái)有人利用致冷和加熱做成了，固定位置升降溫的PCR擴增儀。

　　后來(lái)隨著(zhù)定量技術(shù)的發(fā)展，有公司將擴增儀和檢測做成一體，也就成了現在所謂的全自動(dòng)(或定量)PCR儀。當然標準的叫實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。

　　【品牌】

　　什么東西都有品牌，現在國內國外PCR儀的品牌很多，就國外而言比較著(zhù)名的有：

　　ABI美國應用生物公司：老牌的生物公司貴族，其收購了原來(lái)的PE，而PE公司是PCR的鼻祖，旗下有很多經(jīng)典的PCR儀，有5700(已停產(chǎn))、7700(已停產(chǎn))、7000、7900等實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。

　　ROCHE羅氏診斷：炙手可熱的新貴，LIGHTCYCLER是其唯一的PCR儀，市場(chǎng)做得很不錯，以科研定位為主，但在國內很多醫院使用，其很特色離心、氣加熱、毛細管等，設計另類(lèi)，是最有特色的PCR儀，當然好壞另議，就單其另辟蹊徑的技術(shù)能力和膽識就值的佩服。

　　MJ：剛入中國的名流，MJ的擴增儀在生命科研領(lǐng)域比較出名，其產(chǎn)品比較適合高通量檢測，人類(lèi)基因組計劃用得很多。其實(shí)時(shí)熒光PCR儀剛進(jìn)入中國不久，孔間能使用不同溫度是其特色。這點(diǎn)其實(shí)比較有用。

　　伯樂(lè )：呵，廉價(jià)的麥當勞，ICYCLER是其主打，進(jìn)入中國已經(jīng)比較久了，產(chǎn)品和5700一樣，是擴增儀上加裝定量模塊而成，特點(diǎn)是價(jià)格較低。

　　國內現在做的也很多，比如杭州博日、杭州朗基、上海楓嶺、廈門(mén)安普利等。

　　【選購】

　　準確的講包括實(shí)時(shí)熒光定量在內都沒(méi)有自動(dòng)加樣和標本處理系統，只能算半自動(dòng)的。PCR儀是個(gè)簡(jiǎn)單的東東，一個(gè)溫控設備和一個(gè)檢測設備而已。

　　關(guān)于溫控，主要是介質(zhì)問(wèn)題。理想的介質(zhì)是導熱性好、比熱大、接觸緊密的東東。

　　這方面最好的是水浴和油浴，比熱大(油比水更大)、溶劑化物體，與反應物無(wú)縫接觸，效果當然最好。但是自動(dòng)化，小型化難，只有最初的水浴鍋式使用。

　　硅加熱，這是使用最普遍的一種，優(yōu)點(diǎn)：易自動(dòng)化、速度快、直接加熱降溫，效果當然好，但是第一成本較高，第二其使用的介質(zhì)是金屬，導熱雖然好，但是與反應管，很難做到無(wú)縫接觸，定性時(shí)代可以加油，但用熒光定最，由于油有熒光信號不能用。所以在無(wú)縫接觸上差一些。第三由于是底部加熱，下部壓力較大，有溢出的可能，不過(guò)新的儀器在加熱蓋以后解決了這個(gè)問(wèn)題。

　　空氣加熱，用空氣做介質(zhì)有優(yōu)點(diǎn)，與反應體系無(wú)縫接觸，但是空氣的導熱性差、比熱小的弱點(diǎn)明顯。因此空氣加熱的要利用離心來(lái)產(chǎn)生空氣流動(dòng)，增強導熱性，同時(shí)使用毛細管，加大接觸面積、試劑微量化來(lái)彌補。這樣做了以后效果還是不錯。但有的廠(chǎng)商把什么離心、毛細管的好處大講特講，對氣加熱的弱點(diǎn)閉口不談，卻是高明的市場(chǎng)手法。同時(shí)，使用離心，對標本量增大是有影響的并且標本量越大，空氣比熱小的弱點(diǎn)就越明顯，所以空所加熱的儀器標本量都比較小。使用毛細管后由于反應液與管的接觸面積增大，吸附現象更大，因此試劑的通用性差一般要專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)，成本高，雖然試劑用量少，但因為是專(zhuān)用試劑，每人份就是以實(shí)際量算，并不省試劑。反而增加了毛細管成本。

　　關(guān)于功能，所有的PCR儀功能都大體相同。只有MJ孔間能使用不同溫度比較獨特，這對于多項目同時(shí)檢測以及循環(huán)參數的調整比較有用。但其實(shí)時(shí)熒光的儀器剛進(jìn)入中國不久，具體如何還不得而知。

　　關(guān)于選購，根據單位情況而定，由于PCR的技術(shù)含量其實(shí)并不高，好的國產(chǎn)儀器如杭州博日(與日本著(zhù)名廠(chǎng)商大和有關(guān))也差不太多。關(guān)于進(jìn)口儀器，羅氏的儀器不錯，但如果標本量大，建議不要用羅氏。一則會(huì )累死的。另外，每個(gè)標本要分攤的標準曲線(xiàn)、對照成本太高。同時(shí)，試劑也比較受限。